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目的:此次课题分为临床研究和动物实验研究两个部分。临床研究部分通过对溃疡性结肠炎(直肠型)大肠湿热证患者予以肠愈灌肠方治疗,评价此方的临床疗效;动物实验部分通过观察肠愈灌肠方对溃疡性结肠炎模型大鼠基础情况,肠黏膜损伤情况、结肠组织Occludin、Claudin-1蛋白表达的影响及对Occludin、Claudin-1及ZO-1m RNA的表达水平的影响,综合观察该方对肠黏膜机械屏障的影响,从理论上分析肠愈灌肠方治疗溃疡性结肠炎(直肠型)的相关作用机理。研究方法:临床研究部分:选择符合直肠型溃疡性结肠炎诊断标准且中医证候为大肠湿热证的患者60例,将其作为研究对象,按随机分配原则分为治疗组和对照组,均为30例患者。治疗组予以肠愈灌肠方灌肠治疗,对照组予以美沙拉嗪栓塞肛治疗,疗程均为4周。患者治疗前后以Mayo评分、中医证候疗效、镜下直肠粘膜Baron评分等作为评价指标。动物实验部分:选取购自安徽医科大学实验动物中心SD级雄性大鼠50只,2月龄,体重范围在200±20g之间,全部封闭管理,适应性饲养1周。1周后以随机抽样,随机分为正常组、生理盐水组、美沙拉嗪组、中剂量肠愈灌肠方组及高剂量肠愈灌肠方组,每组大鼠10只。将除正常组外,其余4组大鼠拟用“TNBS/无水乙醇改良复合法”复制UC大鼠模型。模型建立成功后,分别对各组大鼠进行对应药物灌肠处理,连续灌肠治疗4周,观察各组大鼠的一般体征和结肠黏膜损伤指数的变化;运用免疫组化法检测大鼠结肠组织Occludin,Claudin-1的表达变化及PCR法检测Occludin,Claudin-1,ZO-1对应的m RNA表达变化。结果分析:临床研究结果:最终可以进行统计分析的患者共58例,治疗组30例,对照组28例。治疗后,两组患者的Mayo评分均明显降低(P<0.05),说明两种药物对于UC治疗均有效;治疗组Mayo评分、肠镜下黏膜评分改善情况均优于对照组(P<0.05);治疗组中医证候疗效及肠镜下黏膜评分疗效均高于对照组(P<0.05)。表明予以肠愈灌肠方治疗的患者临床疗效较西药美沙拉嗪栓更佳。动物实验部分:模型成功后,各造模组大鼠解棕黄色稀水样便或糊状粪便,大便次数增多,部分伴有黏液脓血便,摄食量明显减少,体重明显减轻,蜷卧不喜活动,皮毛松乱,色偏黄无光泽。与正常组比较,生理盐水组、美沙拉嗪组、中剂量肠愈灌肠方组、高剂量肠愈灌肠方组疾病活动指数DAI评分均明显升高(P<0.05)。表明UC大鼠模型制作完成。疾病活动指数DAI评分比较:与正常组比较,生理盐水组大鼠疾病活动指数DAI评分显著升高(P<0.05);与生理盐水组比较,肠愈灌肠方各浓度组和美沙拉嗪组DAI评分均明显降低,均有显著差异(P<0.05)。与中剂量肠愈灌肠方组相比,美沙拉嗪组DAI评分无显著性差异(P>0.05),高剂量肠愈灌肠方组有显著性差异(P<0.05)。结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分比较:与正常组组比较,生理盐水组CMDI评分明显增加,有统计学差异(P<0.05),表明UC大鼠模型制备成功;与生理盐水组比较,各治疗组CMDI评分明显降低,均有显著差异(P<0.05)。与中剂量肠愈灌肠方组相比,美沙拉嗪组DAI评分无显著性差异(P>0.05),高剂量肠愈灌肠方组有显著性差异(P<0.05)。大鼠结肠组织Occludin、Claudin-1蛋白相对表达水平比较:与正常组相比较,生理盐水组Occludin、Claudin-1蛋白的表达明显降低(P<0.05);经干预治疗后,与生理盐水组相比较,各治疗组Occludin、Claudin-1蛋白的表达均升高(P<0.05);与中剂量治疗组比较,高剂量肠愈灌肠方组、美沙拉嗪栓组Occludin、Claudin-1蛋白的表达升高(P<0.05);与美沙拉嗪组相比较,高剂量肠愈灌肠方组Occludin、Claudin-1蛋白的表达无统计学差异(P>0.05)。大鼠结肠组织Occludin、Claudin-1和ZO-1基因转录水平比较:与正常组相比较,生理盐水组Occludin、Claudin-1和ZO-1 m RNA表达水平明显降低(P<0.05);经干预治疗后,与生理盐水组相比较,各治疗组Occludin、Claudin-1和ZO-1 m RNA表达水平均明显升高(P<0.05);与中剂量肠愈灌肠方组相比较,高剂量肠愈灌肠方组及美沙拉嗪组Occludin、Claudin-1和ZO-1 m RNA的表达升高(P<0.05);与美沙拉嗪组相比较,高剂量肠愈灌肠方组中Occludin、Claudin-1和ZO-1 m RNA的表达相对升高(P<0.05)。结论:1.肠愈灌肠方对于溃疡性结肠炎(直肠型)大肠湿热证患者效果显著,对于Mayo评分、肠镜下黏膜评分及临床疗效方面的改善均优于西药美沙拉嗪。2.肠愈灌肠方对UC大鼠精神、反应、饮食、粪便等一般情况有明显的改善。3.肠愈灌肠方对缓解UC大鼠疾病活动指数、结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分有明显效果。4.肠愈灌肠方治疗UC的作用机制可能与其提高Occludin、Claudin-1表达量及提高Occludin、Claudin-1和ZO-1 m RNA表达有关,通过维护UC大鼠TJ的完整与稳定,间接修复肠黏膜机械屏障功能,从而治疗UC。