PARTⅠ人偏肺病毒在中国大陆的首次分离及其特征目的:分离新近发现的儿童呼吸道病毒病原——人偏肺病毒(Human metapneumovirus, hMPV)中国大陆流行株,并初步阐明其分子流行病学规律。方法:选取重庆医科大学儿童医院因呼吸道感染住院的患儿,无菌采集鼻咽分泌物两份。一份用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A/B、副流感病毒1、2、3型等常见呼吸道病毒病原。另一份标本接种Vero-E6细胞和LLC-MK2细胞进行病毒分离,用含胰酶的病毒生长培养基维持培养至21天,观察细胞病变(CPE)。出现CPE者,采用RT-PCR扩增hMPV N、F基因,F基因扩增产物纯化后测序。用Phylip软件包中的邻接法与最大节约法构建遗传进化树,用Clustal X软件进行F基因序列比对分析。收集分析hMPV感染患儿的临床资料。结果:收集的86份鼻咽分泌物中,有6份接种Vero-E6和LLC-MK2细胞后出现CPE,表现为灶性病变、圆缩、颗粒增多,无明显合胞病变,逐渐发展为细胞脱落、漂浮。用RT-PCR法成功扩增出hMPV N、F基因片段,证实hMPV中国流行株首次分离成功。遗传进化树表明此6株分离株全为A型。序列变异分析提示6株分离株之间,扩增F