生长调节剂对汉源花椒离体培养及植株再生的影响

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汉源花椒(Zanthoxylum bungeanum’Hanyuan’)也称为“贡椒”,其果粒圆大,颜色红(丹红至紫色),有“川味花椒之王”的美誉。2008年汉源花椒名列四川省“十佳地理标志农产品”榜首。本实验以品质优良的汉源花椒母株为试验材料,用其带芽茎段作为外植体,对汉源花椒进行组织培养,研究其组培过程中外植体的启动、增殖、生根以及炼苗移栽技术。着重研究了汉源花椒组培各试验阶段的最佳培养基配方及移栽和炼苗技术。试验结果如下:(1)初代培养:选取汉源花椒当年生半木质化枝条经75%酒精与0.1%升汞不同组合灭菌处理后,接种于以MS为基本培养基添加不同浓度的6.BA、NAA以及IBA生长调节剂的培养基中进行汉源花椒外植体初代培养。经隶属函数计算结果后得出,最佳灭菌处理为75%酒精30 s+0.1%HgCl2 3 min,该组合对提高汉源花椒外植体启动率、降低污染率和死亡率的综合效果最好。最佳的初代培养基激素浓度组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养30 d后的平均启动率可达48.9%,并且诱导出的芽苗平均高度也较高。(2)继代培养:包括培养前期和后期两个阶段,分别观察利于增值和芽苗生长的最佳培养基。选取经初代培养后生长健壮的芽苗接种于继代培养基中培养,其中以MS为基本培养基,生长调节剂为不同浓度的6-BA和NAA试剂。结果表明,继代培养前期的培养基激素浓度组合MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/ L最有利于芽苗的增殖,平均增殖倍数可达2.88。继代培养后期培养基激素浓度组合MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA0.3 mg/L最有利于芽苗生长。(3)生根培养:以1/2MS为基本培养基添加不同浓度的NAA和IBA生长调节剂,将继代培养中生长健壮的芽苗剪成单苗后接种于生根培养基中进行生根诱导。结果表明最佳生根培养基激素浓度组合为1/2MS+IBA2.0 mg/L,培养40 d后生根率可达到47.8%,平均生根数量可达2.9根,平均根长为8.8 mm,在此培养基上诱导出的根生长较一致,且根生长较粗壮。(4)炼苗移栽:选择生长粗壮的生根苗移栽于黄壤、河沙、紫色土以及混合基质中进行炼苗移栽,30 d后成活率最高的基质为2/3黄壤+1/3河沙,其成活率可以达到58.9%。
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