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有机磷农药长期、大量使用引发的食品安全与环境问题日益引起公众和监管机构的重视。目前，有机磷农药及其代谢物的残留检测仍以气相色谱、高效液相色谱及其与质谱联用技术为主，但仪器检测样品前处理耗时，需要专业的技术操作人员，难以实现大批量样品的快速筛选与现场的实时检测。农药小分子的酶联免疫分析（ELISA）为有机磷农药多残留检测开辟了新的领域。本文通过合成通用半抗原，研究有机磷农药多残留同步检测的免疫分析方法。大多数有机磷农药分子具有烷氧基磷酸酯结构，设计的通用半抗原保留了有机磷农药的共性结构特征。利用甲氧基、乙氧基硫代磷酸钠盐与卤代羧酸反应，合成6种具有羧基偶联位点的直链间隔臂半抗原（H1H6）。半抗原分子结构经过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS确认。分别采用活性酯法、混合酸酐法半抗原与牛血清白蛋白、卵清蛋白偶联制备人工抗原。人工抗原的偶联情况用紫外扫描法进行定性分析，用2,4,6-三硝基苯磺酸法测定偶联比。人工抗原H2-BSA、H4-BSA、H5-BSA、H4-OVA、H6-BSA、H6-OVA为免疫原，免疫BALB/c小鼠，制备多克隆抗体，用间接非竞争ELISA测得的各抗血清的效价为256000:1、16000:1、16000:1、8000:1、128000:1、128000:1。选择效价较高的H6-OVA抗血清，包被抗原H6-BSA工作浓度为5μg·mL-1，探究不同有机溶剂、离子浓度和pH对抗体抗原结合反应活性的影响。选用含5%10%的丙酮，离子浓度为10mmol·L-1，pH7.4的磷酸盐缓冲液利于抗体抗原的结合反应。利用上述优化的条件，采用间接竞争ELISA建立了H6-OVA抗血清检测半抗原H1、H2、H4、H6的标准抑制曲线。半抗原H2与抗血清竞争性结合的半数抑制浓度最低，IC50为34.43μg·mL-1。以18种有机磷农药进行交叉反应，抗血清可识别除丙溴磷之外的所有供试有机磷农药，对氧化乐果、毒死蜱的识别能力较好，IC50分别为12.59、8.91μg·mL-1。本论文建立的有机磷多残留免疫分析方法，可同时识别多种有机磷农药，但检测灵敏度达不到实际检测的要求，需进一步改进。