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目的：本课题对治疗结直肠癌的天马颗粒剂复方进行拆方研究,以精选出抗癌作用最佳的组方。方法：体外研究：(1)应用SPSS19.0按17因素(17味中药),3水平(原始剂量、2倍剂量、不用)建立L64(317)天马颗粒剂拆方分组。(2)384只SPF级SD大鼠随机分为64组,予各组复方灌胃给药,10ml/次,1次/天,共7天,腹主动脉取血,离心、灭活,制备成含药血清。(3)将各组含药血清稀释0、4、8和16倍,分别作用CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞24h、48h和72h,MTT法检测各组含药血清对CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞的增殖活力。(4)各组含药血清稀释4倍,分别作用CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞48h,采用流式细胞仪凋亡检测技术分析各组含药血清对CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞凋亡的影响。体内研究：建立CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞荷瘤小鼠模型,天马颗粒剂精简方、原方以及生理盐水分别对三类荷瘤小鼠灌胃,0.5ml/次,1次／天,共28天。药物干预后第0、4、8、12、16、20、24天,卡尺测量各组荷瘤小鼠肿瘤体积,绘制荷瘤小鼠肿瘤生长曲线；末次灌胃后处死荷瘤小鼠,比较各组肿瘤组织的体积和质量；采用HE染色、流式细胞凋亡和周期分析法比较天马颗粒剂精简方、原方和生理盐水对CoLo-320、LoVo和HCT-116荷瘤小鼠肿瘤组织细胞的抑制作用；检测各组荷瘤小鼠的血常规、肝肾功能,评定药物的安全性。结果：体外研究：MTT实验结果表明,不同稀释倍数、不同作用时间的各组天马颗粒剂拆方组,对CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞活力的作用不同,稀释4倍,作用48h,较其它实验组,对CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞活力的抑制作用最明显,以19号拆方组的含药血清,在稀释4倍,干预48h后对细胞活力的抑制作用最强,其吸光值分别为0.346、0.280、0.527,与其它拆方组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞凋亡结果表明,19号拆方组的含药血清对CoLo-320、LoVo和HCT-116促进的凋亡作用最强,凋亡率分别为39.38%、34.9%和16.46%,与其它拆方组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。体内研究：肿瘤生长曲线和体积、质量结果表明,CoLo-320、LoVo和HCT-116荷瘤小鼠精简方(19号拆方组)肿瘤生长速率较原方组及生理盐水组缓慢,肿瘤体积和质量与原方组及生理盐水组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血常规及肝肾功能检测结果显示,各组荷瘤小鼠的检测指标在正常范围,天马颗粒精简方、原方、生理盐水组比较,差异无统计学意义,(P>0.05),表明天马颗粒剂精简方和原方使用是安全的。流式细胞仪的凋亡结果示,天马颗粒剂精简方能明显促进CoLo-320、LoVo和HCT-116荷瘤小鼠细胞的凋亡。CoLo-320组细胞凋亡率由生理盐水组的3.71%和原方组的13.22%上升为精简方组的25.09%；LoVo组由3.3%和9.84%上升为20.97%；HCT-116组由5.87%和15.79%上升为24.96%,精简方组与原方和生理盐水组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪的周期结果示,天马颗粒剂精简方能明显引起CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞G1期的阻滞。CoLo-320组细胞G1期含量由生理盐水组的37.29%和原方组的45.38%上升为精简方组的54.39%；LoVo组由39.34%和49.31%上升为53.49%HCT-116组由42.31%和53.48%上升为57.67%,表明天马颗粒剂精简方可诱导细胞G1期阻滞而抑制细胞增殖,阻滞效果优于原方。HE染色结果显示,精简方较原方和生理盐水组中肿瘤组织的空泡数目增多,凋亡增加。结论：天马颗粒剂19号拆方为本课题筛选出的对CoLo-320、LoVo和HCT-116细胞抗癌作用最佳的组方