家蝇野外品系与溴氰菊酯敏感品系的蛋白表达差异研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenzl1999
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近年来,伴随人类基因组计划的顺利进行和完成,生命科学的研究进入后基因组时代。在这个时代,生命科学的主要研究对象已从基因组学研究向功能基因组学、蛋白质组学和细胞代谢组学等转移。家蝇是人类许多传染性疾病如霍乱、志贺氏菌病和沙门氏菌病等重要疾病的载体,对其采取有效的控制一直是人们研究工作中的重点。对其防治中的一个重要的问题之一在于家蝇的抗药性发展速度非常快。本论文利用二维液相色谱技术并结果传统的双向电泳技术,对家蝇野外品系和家蝇溴氰菊酯敏感品系成虫的总蛋白混合物进行了分离,对各分离数据用ProteoVue、DeltaVue和Imagemaster 2D platinum软件进行比对分析,获得了家蝇不同抗药性条件下的蛋白质差异表达谱。主要结果如下: 1.对家蝇野外品系和溴氰菊酯敏感品系成虫的蛋白质进行了二维液相色谱分离及数据分析,结果表明pⅠ大于8.4的碱性蛋白,家蝇野外品系检测到的蛋白峰为251个,溴氰菊酯敏感品系为237个。pⅠ值介于8.4-4.2的蛋白,家蝇野外品系检测到的蛋白峰228个,溴氰菊酯敏感品系为303个。pⅠ值小于4.2的酸性蛋白,家蝇野外品系检测到的蛋白峰132个,溴氰菊酯敏感品系为168个。所检测到的蛋白中,两者相比表达变化在两倍以上的有99个峰,其中在野外品系中表达上调的有43个,下调的56个;等电点pⅠ在8.4-4.2区段,野外品系中表达上调的有14个,下调的48个。 2.利用双向电泳技术对家蝇野外品系和家蝇溴氰菊酯敏感品系成虫的蛋白质进行了分析。家蝇野外品系检测到339个蛋白点,溴氰菊酯敏感品系450个蛋白点。发现家蝇野外品系pⅠ点在4-8的蛋白点占其总检测蛋白的94.44%,家蝇溴氰菊酯敏感品系pⅠ点在4-8的蛋白点占其总检测蛋白的94.98%。两者比较差异在2倍以上的蛋白点,在pⅠ在4-8区段,野外品系上调的蛋白点16个,下调的点52个。 3、综合家蝇蛋白质二维液相色谱技术和双向电泳技术的分离和分析结果,二维液相色谱技术共从两个材料中获得1319个峰,其中家蝇野外品系为611个,溴氰菊酯708个,这些峰均按保留时间进行收集。双向电泳共获得789个点,其中家蝇339个,溴氰菊酯敏感品系450个。二维色谱分离的组分比双向电泳多530个,多74%。无论是双向电泳还是二维液相色谱分离,其结果都是敏感品系比抗
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