L-肉碱的提取检测及减肥抗疲劳功能的研究

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本文采取三种不同溶剂(水、高氯酸、盐酸)提取不同品种肉(羊肉、牛肉、猪肉、鸡肉)的L-肉碱,并用酶法和高效液相色谱法对采用不同提取方法及不同品种肉(羊肉、猪肉、牛肉、鸡肉)中的L-肉碱含量进行比较,得出结论:1、高效液相法不易受样品中其它物质的影响,且比酶法更简便、快速、准确的检测出肉中L-肉碱的含量;2、羊肉中的肉碱在四种肉中含量较高,高氯酸的提取效果在三种溶剂中是最好的,考虑到实用性问题,用盐酸作为提取溶剂,也能得到较好的提取效果。 动物实验用昆明种小鼠,使其口服L-肉碱溶液剂量为10mg/g.d、30mg/g.d(Ⅱ,Ⅳ组分别喂养10mg/g.d、30mg/g.d的化学合成的L-肉碱,Ⅲ组喂养10mg/g.d羊肉提取的L-肉碱),采用组间对照的方法:1、测定小鼠的体重和游泳时间,数据显示,小鼠体重明显下降(P<0.01),游泳时间显著延长(P<0.01);2、试剂盒测定血清总胆固醇、甘油三酯、乳酸、尿素氮生理生化指标,真空冷冻干燥测定肌肉水分,高效液相法测定小鼠腿部肌肉L-肉碱含量,实验结果表明,与对照组相比,L-肉碱对小鼠的生长发育没有不良影响,却能显著降低体内总胆固醇、甘油三酯的含量(P<0.01),摄入L-肉碱的小鼠组血清尿素氮、乳酸含量远远低于对照组(P<0.01);3、高效液相色谱法显示,各组小鼠的体内L-肉碱的含量与游泳时间成正比;实验结果还显示,减肥、抗疲劳效果:服用30mg/g.d小鼠组的效果并不比服用10mg/g.d小鼠组强;化学合成肉碱不如天然提取的L-肉碱对小鼠效果好。 再取三组昆明种小鼠做交叉实验,口服L-肉碱剂量为10mg/g.d,一组为对照组,另两组喂L-肉碱(Ⅱ组羊肉提取的L-肉碱,Ⅲ组化学合成的L-肉碱),一段时间后,交换喂养。实验结果证明,L-肉碱的作用没有持续性。此外,同上面方法,测生理生化指标,肌肉水分含量,L-肉碱含量,结果证明L-肉碱效果的不持续性。最后,提取小鼠腿部肌肉中的脂肪,甲酯化,用气相色谱-质谱法分析各个脂肪酸片断,验证L-肉碱帮助运输长链脂肪酸进入线粒体氧化的作用。
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