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目的:优化大孔吸附树脂对野生中华猕猴桃根总三萜(tt-RAC)的提取工艺,并进一步探究总三萜对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用和肠癌细胞LOVO的侵袭和转移抑制作用。方法:用75%乙醇浸泡样品粉末,分别以40%,50%,60%,70%,80%及95%乙醇为有机溶剂,以中华猕猴桃根总三萜百分含量为指标,确定AB-8型大孔吸附树脂对总三萜的提取工艺条件;选取中华猕猴桃根总三萜百分含量最高组作为后续实验样品,采用细胞增殖与活性检测试验(CCK-8法)检测不同浓度(25,50,100,200,400 ug/ml)野生中华猕猴桃根总三萜(tt-RAC)对人肠癌SW480细胞、LOVO细胞,人乳腺癌MCF-7细胞及人肝癌SMMC-7721细胞的增殖作用,并计算tt-RAC作用于不同细胞的半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术(FCM)分析其对肠癌SW480细胞周期分布的影响;采用划痕实验观察tt-RAC对LOVO细胞迁移影响,以划痕两侧细胞向中心迁移的距离为指标;并进一步用transwell小室试验观察tt-RAC对LOVO细胞穿透能力的影响,以判断对肿瘤细胞侵袭运动的作用;最后,运用Western Blotting(WB)实验检测上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关基因E-cadherin、N-cadherin和vimentin在蛋白水平上的表达差异。结果:AB-8大孔吸附树脂提取中华猕猴桃根总三萜的最佳工艺条件为:中华猕猴桃根上样液浓度为2.8mg/ml,PH值为7,上样流速为1BV/h;洗脱体积为4倍树脂柱床体积(4BV),洗脱流速为2BV/h。经40%乙醇洗脱提取的中华猕猴桃根总三萜的百分含量最高为75.89%。因此,选取40%乙醇提取的中华猕猴桃根总三萜(tt-RAC)做后续实验,其对四种肿瘤细胞增殖均有抑制作用并呈浓度和时间依赖性;其中对SW480细胞的抑制作用最强,其机制可能是通过诱导SW480细胞发生S和G2期阻滞引起的。在划痕试验中,将药物浓度低于IC50的tt-RAC作用于LOVO细胞结果显示,低浓度tt-RAC可抑制划痕两侧LOVO细胞向划痕中心迁移。Transwell实验同样显示低浓度tt-RAC抑制上室细胞向下室侵袭,随浓度增高侵入下室细胞数量逐渐减少,呈浓度依赖性。WB实验结果显示tt-RAC抑制LOVO细胞侵袭和转移作用可能是通过上调E-cadherin蛋白表达水平及下调N-cadherin和vimentin蛋白表达水平实现的。结论:以乙醇作为有机溶剂,使用AB-8大孔吸附树脂对中华猕猴桃根总三萜进行提取,该工艺具有成本低、安全稳定、操作简单和取得率高等优势;且所得tt-RAC对人肠癌SW480细胞、LOVO细胞,人乳腺癌MCF-7细胞及人肝癌SMMC-7721细胞都具有细胞毒作用,其机制可能是通过诱导细胞周期发生S和G2期阻滞;tt-RAC亦可抑制肿瘤细胞侵袭和迁移,抑制上皮细胞向间质细胞转化,可能的机制是与E-cadherin蛋白表达水平上调及N-cadherin和vimentin蛋白的表达水平下调相关。