黑木相思(Acacia melanoxylon)为含羞草科(Mimosaceae)金合欢属(AcaciaMill.)乔木,作为中短轮伐期珍贵树种,现已成为我国多个省份首推的相思树种。近年来,广东省部分黑木相思种植基地发生了一种新病害,该病害导致枝干枯死或植株死亡,造成了严重经济损失,制约了当地黑木相思的推广种植。为此,本研究对广东省黑木相思病区进行调查,采集病组织进行病原菌分离、纯化、鉴定和致病性测定,以确定病原菌,并检测了不同无性系的抗病性,为进一步研究该病害的预防措施提供参考。主要研究成果如下:1、本研究发现了一种新病害,黑木相思白腐病。该病害多于春季发病,发病率27%,主要发生在4~6年生树木,发病枝干直径约6~10cm,病斑梭形,主干或侧枝发病部位树皮下陷,病健交界分明,剖开树皮可观察到病健交界处有明显的棕色至黑色分界线。从发病部位的横向和纵向剖面可看出韧皮部呈褐色或棕黑色,木质部呈深褐色或黑色。发病多年的树木树皮开裂,剖开树皮可看到白色腐朽物。该病害造成黑木相思枝干一边枯死,严重时可致整株枯死。2、验证柯赫氏法则。通过病原菌分离、纯化、致病性测定及再分离,初步判定黑木相思白腐病病原菌。使用目的菌株接种半年生和两年生黑木相思17号无性系植株,发病症状与林间自然发病症状相一致,再分离得到菌株与接种菌株相一致。接种后,在发病初期,病斑梭形,棕色至黑色,下陷,病健交界分明,交界处病斑颜色加深,剖开树皮有黑色分界线,病斑绕茎横向扩展至3/4左右;发病后期,枝干变色枯死,植株近根部有绿色小芽长出,严重时可致整株死亡。3、结合形态学和分子生物学完成病原菌鉴定。采用常规组织分离法获得的目的菌株在PDA平板上的形态特征为菌落白色,辐射状,菌丝稀疏,呈绒毛状,后变致密,呈毡状平伏于平板;愈创木酚反应8min后,滴定区域变浅红;菌丝透明,光滑,较直,具锁状联合,常从联合处分支,初期直径3.5~4.2μm,后期直径2.6~3.4μm;分生孢子圆柱状,薄壁,无色,内含有0~3个球状体,多数为1个,孢子大小5.6~9.4×2.5~3.5μm。利用引物ITS1/ITS4、ITS5/ITS4和ITS1-F/ITS4-B对目的菌株进行扩增,得到长度分别为558bp、577bp、726bp的序列,BLAST比对分析后显示目的菌株与Pseudolagarobasidium acaciicola同源性分别为99%、99%、98%。将测序结果提交到GenBank上,获得登记号分别为MF099657、MF135489、MF135490。结合形态学确定该病原菌为相思生伪壶担菌(P.acaciicola),其分类地位为真菌界(Fungi),担子菌门(Basidiomycota),伞菌纲(Agaricomycetes),多孔菌目(Polyporales),原毛平革菌科(Phanerochaetaceae),伪壶担菌属(Pseudolagarobasidium J.C.Jang&T.Chen)。该菌种是我国新纪录种,也是世界首次报道的由相思生伪壶担菌引起的黑木相思病害病原。4、黑木相思不同无性系对白腐病抗性评价。结果显示,黑木相思6号、17号、20号、47号无性系对白腐病的抗性存在明显差异。初步认为,6号无性系为中抗,20号无性系为低抗,47号无性系为低感,17号无性系为高感。