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酶作为催化剂,可以高度特异地增加化学反应的速率,而DNA重组技术和发酵技术的发展又大大增强工业酶在生产中的作用。目前,我国国有企业工业酶总产量达到每年40余万吨,并呈逐年增长趋势。含工业酶粉尘对工人的健康影响主要为其基质(matrix)引起的非特异性刺激作用(non-specific irritation)和工业酶引起的致敏现象(sensitization)、枯草热(hay fever)样症状、风疹(urticaria)和职业性哮喘(occupational asthma)。为了保护工人健康,我国和国外许多国家、组织与企业都制定了枯草杆菌蛋白酶的职业接触限值(occupational exposure limits,OELs),如我国制定的时间加权平均容许浓度(PC-TwA)为15 ng/m<3>结晶活性纯酶(CAPE),短时间接触容许浓度(PC-STEL)为30ng/m<3>结晶活性纯酶;美国工业卫生学家协会(AGCIH)建议的峰值(TLV-C)为60 ng/m<3>结晶活性纯酶。
我国已步入工业酶生产大国的行列,产量大,职业接触人群多,急需制定相应职业接触限值来保护工人健康,促进酶制剂工业的发展。为此,我们对四家工业酶生产企业(A、B、C厂生产粉状酶,C厂还生产未包被的颗粒酶,其均为工业粗酶;D厂生产包裹酶,其为工业纯酶)进行了环境监测,并对324名含工业酶粉尘接触工人和173名参加就业前健康检查的对照工人进行健康效应评价。环境监测采用Gilian-Aircon2大容量采样器(25L/m)和MSA-ESCORTELF个体采样器(2L/m)。含工业酶粉尘浓度采用滤膜增重法测定,A、B、C 厂工业酶浓度采用酶活力检测法测定,D厂工业酶浓度采用ELISA测定。应用问卷调查,肺功能检查(PFT)和皮肤点刺试验(SPT)评价含工业酶粉尘对工人的健康影响。同时,通过动物实验探索工业酶引起致敏效应而不产生过敏反应的最低有害作用剂量(LOAEL),为工业酶卫生标准的制定提供实验依据。
环境检测显示,A、B、C厂生产粉状酶和未包被颗粒酶的作业环境中含工业酶粉尘浓度均高于1mg/m<3>,D厂各工段含工业酶粉尘浓度均低于1mg/m<3>;A、B、C厂作业环境空气中工业粗酶浓度低于15μg/m<3>,D厂工业纯酶浓度低于15ng/m<3>CAPE。问卷调查表明,当粉尘浓度高于4mg/m<3>,接触者鼻部和眼部刺激的发生率均明显高于对照组(p<0.05);当粉尘浓度低于4mg/m<3>,刺激症状的发生率与对照组比较,均无显著统计学差异(P>0.05)。应用基准剂量计算软件计算得出,较为敏感的鼻部粘膜刺激症状的BMDL为3.84 mg/m<3>。接触组与对照组肺功能检测的各项指标和肺功能异常率无显著统计学差异(P>0.05);有刺激症状和无刺激症状工人间肺功能的差异也无统计学意义(P>0.05),提示在目前含工业酶粉尘接触水平下,只引起工人明显的刺激症状,不至于引发肺功能的下降。SPT结果显示,对照组无人致敏,表明同常接触工业酶没有引起致敏;A、B、C、D厂接触工人年致敏率均低于3%。A、B、C厂致敏与非致敏工人间症状发生率和肺功能的差异均无统计学意义(P>0.05),表明当工业粗酶浓度低于15μg/m<3>,只引起工人出现致敏现象,而不引起过敏反应和肺功能下降。D厂致敏与非致敏工人间症状发生率和肿功能也无显著差异(P>0.05),表明当工业纯酶浓度低于15ng/m<3>,只引起工人出现致敏现象;动物实验也提示,12ng/m<3>CAPE为对人产生致敏现象而未引发过敏反应的最低有害作用浓度。根据本次研究结果,参考国外相关文献和经验,结合我国国情,同时考虑到本次调查的样本量较小,取安全系数2,建议含工业酶粉尘时间加权平均容许浓度为2 mg/m<3>,短时间接触容许浓度为4mg/m<3>。建议高纯度的工业纯酶作业场所工业酶时间加权平均容许浓度为15 ng/m<3>结晶活性纯酶,短时间接触容许浓度为30 ng/m<3>结晶活性纯酶:考虑到我国工业粗酶生产工艺在不断改进,工业酶的纯度和致敏力将不断提高,取安全系数10,建议纯度较低的工业粗酶作业场所工业酶时间加权平均容许浓度为2μg/m<3>,短时间接触容许浓度为4μg/m<3>。