碳纳米管处理对文心兰类原球茎增殖、分化和无菌苗生长的影响及相关机理研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ewen2005
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文心兰(Oncidium),又名跳舞兰等,是兰科(Orchidaceae)树兰亚科(Epidendroideae)文心兰属(Oncidium)植物的总称。文心兰花型优美,花色丰富艳丽,花茎轻盈下垂,极具观赏价值。文心兰的工厂化生产通常采用不同外植体进行离体培养实现。兰花组织培养技术自建立以来,经过几十年的发展目前已较成熟。就文心兰而言,人们发现生长调节剂、有机添加物、基本培养基,培养容器、碳源等因素对外植体的培养效果具有重要的影响。碳纳米管(CNTs)是一种新型的纳米材料,具有粒径小、质量轻等特殊性质,常用于航天、电子、化工、医药等行业,近年来也有人开始尝试将其应用于农业中,探讨CNTs对植物生长发育的影响,但目前尚未见CNTs应用于文心兰PLBs培养的报道。为探明CNTs在植物组织培养中的生理效应,本研究采用不同浓度的CNTs处理文心兰PLBs和无菌苗,分析CNTs对其生长的影响,同时研究了 CNTs处理对文心兰PLBs影响的生理生化特征。主要研究结果如下:1.文心兰PLBs增殖培养基中添加25 mg·L-1的CNTs对文心兰PLBs的增殖具有明显促进作用,同时发现这种促进作用在液体培养条件下效果更明显,当CNTs浓度继续上升,则促进作用减弱;分化培养基中添加50 mg·L-1的CNTs对文心兰PLBs的分化效果较好,但是高浓度的CNTs促进效果减弱;在文心兰无菌苗生根培养中,25 mg·L-1的CNTs对幼苗生长具有较好的促进效果,而50 mg-L-1的CNTs对幼苗生根的促进作用明显;CNTs的添加对幼苗的正常分蘖有抑制作用,抑制作用随浓度的增加而增加。2.CNTs的添加对文心兰PLBs正常的新陈代谢存在影响,可以激发PLBs的抗氧化酶活性。CNTs处理组的PLBs相对于对照组,其体内的超氧阴离子产生速率、MDA含量在处理前中期均高于对照组,且所有结果随处理时间延长而升高;在处理后期,对照组的数值上升迅速,而处理组数值有所下降,其中25 mg·L-1处理组下降幅度最大,达到4组处理中的最低值。CNTs处理组的可溶性糖含量也呈先上升后下降的趋势,在处理前中期高于对照组,后期低于对照组。CNTs处理组的可溶性蛋白质含量平均水平较低,50、100 mg-L-1处理组在多数时候低于对照组,而25 mg·L-1处理组在4组中最高。3.通过制作石蜡切片分析了经过不同时间和不同浓度CNTs处理后的文心兰PLBs的组织学特征。观察发现,培养基中添加CNNTs的文心兰PLBs内部或者表面有团聚的CNTs颗粒出现。这说明,CNTs可以进入细胞内部从而对细胞正常的新陈代谢产生一定影响。
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