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研究背景共济失调毛细血管扩张症(ataxia-telangiectasia,AT)也称Louis-Bar综合征,是一种罕见的常染色体隐性遗传病,发病率1/100 000~1/40 000。典型的临床表现为进行性小脑共济失调,眼球结膜和皮肤毛细血管扩张,免疫缺陷以及反复发作的副鼻窦炎和肺部感染,对电离辐射敏感以及肿瘤的高发病率。1995年Shiloh Y确定共济失调毛细血管扩张突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM基因)是导致AT的唯一病因,其编码产物为ATM蛋白,ATM基因突变引起ATM蛋白在胞质中的功能缺陷,从而导致基因组不稳定、染色体断裂及重排,造成神经、血管、皮肤和内分泌等多系统受损,尤其是神经系统损害最严重。ATM基因突变检测是AT诊断的金标准。共济失调毛细血管扩张症是一种进行性加重的遗传性疾病,病程晚期患儿多死于感染和肿瘤,总体预后不良,这给患儿和家庭带来巨大痛苦。所以总结共济失调毛细血管扩张症的临床表现,对临床怀疑AT的患儿尽早进行基因突变检测,争取做到早发现、早诊断、早治疗。同时对患者和家庭成员进行基因突变分析,从而为其家庭提供遗传咨询和产前诊断,可以减少该类遗传性疾病的发生。目的总结来自无任何血缘关系的2个家系中2例共济失调毛细血管扩张症患儿的临床特点及生化特征,采用基因测序的方法研究共济失调毛细血管扩张症患儿发病的分子遗传学方式和基因突变类型,推断其相关性,从而为患儿家庭提供遗传咨询和产前诊断。方法经郑州大学第一附属医院伦理委员会审核,获得患儿家属知情同意后,收集2个共济失调毛细血管扩张症家系2名先证者和家庭成员的资料(临床资料、外周血标本)。此外采集20名同期门诊健康体检儿童的血标本作为对照组。使用Gene DNA Kit提取试剂盒提取外周血标本基因组DNA,对全外显子基因进行二代测序,将检测出的突变与GeneBank中原始基因序列进行比对分析,然后采用Sanger测序对所有具有临床意义的突变位点进行验证。结果1.家系1中,二代测序发现先证者ATM基因出现复合杂合突变,分别是:chr11:108202282上c.7627delA的杂合突变和chr11:108214065上c.8385-8394del的杂合突变。Sanger测序的验证结果与二代测序结果一致,发现先证者ATM基因有两处杂合核苷酸变异,分别是chr11:108202282上c.7627delA和chr11:108214065上c.8385-8394del。上述两种突变分别来自于先证者父亲和母亲,父亲ATM基因发现chr11:108202282上c.7627delA的杂合突变,母亲ATM基因发现chr11:108214065上c.8385-8394del的杂合突变。2.家系2中,二代测序发现先证者ATM基因出现复合杂合突变,分别是:chr11:108138069上c.2638delG的杂合突变和chr11:108141874上c.2921+1G>C杂合突变。Sanger测序的验证结果与二代测序结果一致,发现先证者ATM基因有两处杂合核苷酸变异,分别是chr11:108138069上c.2638delG和chr11:108141874上c.2921+1G>C。先证者母亲ATM基因发现chr11:108138069上c.2638delG的杂合突变,由于父亲已故原因未采集血样,杂合突变c.2921+1G>C可能遗传自父亲或者新发突变。结论1.收集的2个家系中的先证者均符合共济失调毛细血管扩张症的临床表现、生化特征及基因突变类型,诊断明确。2.家系1中发现c.7627delA、c.8385-8394del新突变,家系2中发现c.2638delG、c.2921+1G>C新突变,以上4种新突变的致病性均未见文献报道,丰富了国内外在共济失调毛细血管扩张症分子遗传学领域的研究。