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目的：体外培养鼠源C6胶质瘤细胞；建立SD大鼠C6胶质瘤细胞原位移植动物模型,观察PA-MSHA制剂对其成瘤性的作用,探讨PA-MSHA在体内引起肿瘤生长抑制的作用机制,为胶质瘤手术后辅助治疗探索切实有效的新方法。方法：体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,选用雄性健康清洁级Sprague-dawley(SD)大鼠30只,体重在200g±20 g,立体定向方法建立大鼠C6胶质瘤脑模型,把种瘤成功大鼠随机分为两组,Ⅰ.对照组(不做任何处理,任肿瘤生长)Ⅱ.PA-MSHA治疗组。通过体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,测定细胞活力,收集对数生长期状态良好的C6胶质瘤细胞,调整细胞浓度为1.0×107/ml,按1.0×107个细胞/只鼠的细胞数接种,动物脑立体定向仪辅助定位右侧额叶皮质下区(中线旁开2mm,前囟前3mm),每只鼠微量注射器注射20μl。颅内原位接种C6胶质瘤细胞第7天,原穿刺部位两组分别隔天注射0.1ml PA-MSHA和不做治疗,连续两周；观察荷瘤鼠给药前后的一般精神状态、饮食、体重、肢体偏瘫情况及记录生存时间；HE染色和透射电镜形态学观察C6胶质瘤组织：于第7天采集对照组外周静脉血、第20天采集治疗组外周静脉血、再采集正常大鼠外周静脉血,流式细胞仪检测分别三组大鼠的T细胞亚群。结果：1.成功建立SD大鼠C6胶质瘤移植动物模型本实验所用C6胶质瘤细胞,常规培养条件下细胞呈贴壁生长,收集对数生长期状态良好的C6胶质瘤细胞,进行活力测定,存活率>95%,进行大鼠脑内接种。接种后7天可观察到大鼠行为明显变化,20只模型建立成功,后用病理证实。2.荷瘤鼠给药后的一般情况20只SD大鼠接种C6胶质瘤细胞7天,表现为活动能力减弱,肢体肌力减退,自身旋转、蹒跚步态,随时间增加出现肢体偏瘫等症状。3.HE染色形态学和透射电镜观察C6胶质瘤组织大鼠于接种后20天,麻醉下抽取静脉血后处死大鼠,分离脑组织切除瘤组织。HE染色可见PA-MSHA治疗组C6胶质瘤细胞数目较对照组减少,并可见到胶质瘤细胞核分裂像减少、部分区域出现变性坏死,并可见明显的炎症反应。电镜结果可见对照组C6胶质瘤细胞核呈不规则形,可见核切迹,细胞核大,染色质分布均匀；PA-MSHA治疗组C6胶质瘤细胞核固缩,染色质边集,排列于核膜内侧,呈早期凋亡改变。4.流式细胞仪检测铜绿假单胞菌制剂对T细胞亚群的影响流式细胞仪检测第7天对照组、第20天治疗组、正常大鼠的外周静脉血的CD3、CD4、CD8,结果显示：对照组与正常组比CD3、CD4显著下降,CD8变化趋势不明显,CD4/CD8显著下降(P<0.05); PA-MSHA组与对照组相比：CD3、CD4显著升高,CD8显著下降,CD4/CD8显著升高(P<0.05)。结论：铜绿假单胞菌(PA-MSHA)制剂对C6胶质瘤增殖和侵袭性生长具有抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡,提升机体免疫功能有关,并可以调节其它细胞因子的表达。