蒲公英叶中绿原酸的提取工艺及其体外降血脂的研究

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蒲公英(Dandelion)为菊科植物,又名婆婆丁,黄花等,是一味重要的临床常用草药。其资源丰富,来源广泛,价格低廉,主要含有黄酮类、多糖类、色素类、有机酸类物质。绿原酸具有抗菌、抗病毒、降血压血脂、抗癌等疗效。蒲公英中绿原酸含量丰富,尤其是蒲公英叶中绿原酸含量较高,但对蒲公英叶中绿原酸降血脂功效的研究较少。因此本课题对蒲公英叶中的绿原酸进行提取,采用大孔树脂法对蒲公英提取液进一步的分离提纯,冷冻干燥后得到高纯度的绿原酸,并通过其与不同种胆酸钠盐结合能力,评价其体外降血脂功能,为更全面开发和利用蒲公英打开新市场。主要研究如下:(1)蒲公英叶中绿原酸的提取通过预实验采用传统的乙醇回流法和超声波辅助提取法筛选出蒲公英叶中绿原酸最佳提取工艺,最终确定提取绿原酸得率更高的超声波辅助法提取蒲公英叶中绿原酸的方法来进行提取。且时间短、效率快。在单因素试验的基础上优选试验因素与水平,通过响应面设计法,研究提取物中绿原酸得率,以确定最佳的提取工艺。结果表明:最佳提取工艺条件:料液比1:16(g/m L)、乙醇体积分数80%、超声提取温度60℃、超声波功率50 W、超声波频率60 KHz;在此条件下蒲公英叶中绿原酸得率可达28.56 mg/g。为今后蒲公英叶中绿原酸的提取与开发方面提供了广阔的市场。(2)蒲公英叶中绿原酸的分离纯化研究探讨大孔树脂D1300、大孔树脂HZ-816、大孔树脂NKA-9三种大孔树脂对蒲公英叶中绿原酸的吸附率和解吸率,从而选择出最优的大孔树脂NKA-9对蒲公英叶中的绿原酸进行纯化,本论文在单因素的基础上通过响应面法优化蒲公英叶中绿原酸的纯化工艺。研究结果表明:蒲公英叶中绿原酸的最佳纯化工艺条件:上样流速2.0 BV/h;上样液浓度2.0 mg/m L;上样体积5.0 BV;洗脱条件为洗脱液流速2.0 BV/h;洗脱液浓度50%的乙醇;洗脱液体积4.0 BV。得到蒲公英叶中绿原酸得率17.31 mg/g。(3)蒲公英叶中绿原酸的表征采用紫外光谱、红外光谱以及高效液相/质谱联用检测方法分析鉴定蒲公英叶中的绿原酸物质,结果表明蒲公英叶中含有绿原酸。(4)蒲公英叶中绿原酸的体外降血脂活性的研究通过模拟胃肠道环境,利用两种胆酸钠盐与蒲公英叶中绿原酸的结合能力评价其降血脂功能,进行大量方案验证试验证明其降血脂活性,比传统的小鼠实验周期短,更易得到。结果表明蒲公英叶中绿原酸与胆酸钠盐结合能力较高,降血脂功能明显。为今后蒲公英叶中绿原酸的降血脂功能产品的开发提供了广阔的市场。
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