【摘 要】
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目的:研究三羟异黄酮(Genistein)对人红白血病细胞系K562与其多药耐药细胞系K562/ADM的生长抑制、诱导凋亡作用及探讨其可能的作用机理。 方法: 1、不同浓度的三羟异黄酮处理
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目的:研究三羟异黄酮(Genistein)对人红白血病细胞系K562与其多药耐药细胞系K562/ADM的生长抑制、诱导凋亡作用及探讨其可能的作用机理。 方法: 1、不同浓度的三羟异黄酮处理K562细胞与K562/ADM细胞后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长增殖作用。 2、Wright-Gimesa法观察三羟异黄酮对K562细胞的形态学变化。 3、琼脂糖凝胶电泳观察三羟异黄酮对K562细胞的DNA电泳带。 4、流式细胞术分析细胞周期。 5、流式细胞术检测Bcl-2蛋白的表达阳性率和平均荧光强度。 6、免疫细胞化学ABC法分析Bcl-2和Bax蛋白的表达。 结果: 1、三羟异黄酮对K562细胞及K562/ADM细胞均有很强的生长抑制作用。三羟异黄酮作用24h、48h、72h时对K562细胞及K562/ADM细胞的生长抑制率与浓度呈正相关;三羟异黄酮对K562/ADM细胞的耐药倍数为1.67倍; 2、三羟异黄酮作用K562细胞48h,随着浓度增加,凋亡细胞百分率对应增加,细胞凋亡率与浓度有依赖性,细胞周期分布检测显示:可见亚G1期细胞增多,G1期、S期细胞减少,G2/M期细咆增多,提示细胞发生G2/M期阻滞。而三羟异黄酮作用K562/ADM细胞,细胞组间凋亡率没有K562细胞变化明显,但细胞也发生明显的G2/M期阻滞; 3、不同浓度三羟异黄酮作用K562细胞48h,Bcl-2蛋白阳性表达率和平均荧光强度随浓度增加逐渐下降。但K562/ADM细胞的Bcl-2蛋白阳性表达率和平均荧光强度均无明显变化; 4、不同浓度三羟异黄酮对K562细胞的bax蛋白阳性表达率100%,明显高于对照组,组间比较有显著性差异(p<0.05);而Bcl-2蛋白在实验组同对照组细胞比较阳
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