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目的:探讨人激肽释放酶结合蛋白(Kallistatin,KS)重组体腺病毒(Ad-KS)对脓毒症大鼠血清炎症介质及肺组织细胞凋亡的作用。方法:1、清洁级健康雄性SD大鼠32只,体重280±20g,随机分成4组,分别为假手术组(SC组)、脓毒症组(SEP组)、Ad-KS处理组(KS组)、空腺病毒(Ad-Null)对照组(AC组)。盲肠穿孔结扎术(cecal ligation and puncture,CLP)制备大鼠脓毒症模型。2、KS组大鼠CLP术前48h经大鼠尾静脉注射Ad-KS进行基因转染,使大鼠体内表达人KS蛋白。AC组注射Ad-Null腺病毒作为对照。3、所有存活大鼠术后24h经腹主动脉采血行血气分析,经心脏采血行血常规、血生化,留取血清备用,放血法处死大鼠,快速取肺组织。4、苏木精-伊红染色(HE)观察肺组织病理形态改变。ELISA法检测血清炎症介质TNF-α、IL-6及IL-10水平,Western Blot法检测肺组织Caspase-3、Bax及Bcl-2的表达。TUNEL检测观察肺组织细胞凋亡情况。结果:1、肺组织常规病理切片及HE染色发现,SC组肺泡结构完整,间质未见增厚水肿,无明显中性粒细胞及红细胞浸润。SEP组、AC组肺泡萎陷,肺泡腔缩小,肺间质增厚、充血水肿,间质内大量中性粒细胞、红细胞浸润,部分可见肺实变。KS组与SEP组、AC组比较,肺泡萎陷程度减轻,间质充血水肿及浸润减轻。2、ELISA检测血清炎症介质水平,SEP组、AC组血清促炎因子TNF-α、IL-6较SC组升高(P<0.05),但抗炎因子IL-10无明显升高。KS组血清TNF-α、IL-6较SEP组、AC组下降,抗炎因子IL-10升高(P<0.05)。3、Western blot检测肺组织凋亡相关蛋白表达,SEP组、AC组肺组织Caspase-3表达较SC组明显增加(P<0.05)。KS组肺组织Caspase-3表达较SEP组、AC组减少。促凋亡蛋白Bax及抗凋亡蛋白Bcl-2表达在SC组、SEP组、AC组间无明显差异。KS组其Bax表达较其他三组减少,Bcl-2表达增加(P<0.05)。4、TUNEL观察肺组织细胞凋亡情况,SEP组、AC组较SC组肺组织细胞凋亡增加,KS组与SEP组、AC组相比凋亡减少。SEP组与AC组间无明显差异。结论:1、Kallistatin重组体腺病毒降低脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-6水平、升高IL-10水平,发挥抗炎作用。2、Kallistatin重组体腺病毒抑制脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡及Caspase-3的表达,减轻肺损伤。