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杜仲(Eucommia ulmoides Oliver),传统以皮入药,杜仲叶中的化学成分和皮十分相似。植物体内的多酚类物质具有抗氧化、抗衰老、抗辐射等多种作用,经常称之为“第七类营养素”,在食品、化妆品等行业具有广阔的应用前景。本文以杜仲叶为原料,优化杜仲叶总多酚提取工艺,并对杜仲叶总多酚提取物开展相关活性研究,为杜仲叶在功能性食品和化妆品领域的开发和应用提供理论依据。研究的主要内容及结果如下:1、表面活性剂超声波辅助提取杜仲叶总多酚工艺。首先考察表面活性剂种类、用量、乙醇体积分数、料液比、超声时间、提取温度对杜仲叶总多酚提取的影响。在单因素实验基础上,选取乙醇体积分数、料液比、温度,进行正交实验。结果表明3个单因素对杜仲叶总多酚得率的影响次序依次为:乙醇体积分数>提取温度>料液比。综合考虑提取效率、能耗和生产成本等因素,确定最优工艺为SDS用量0.1 g/L,超声时间5 min,乙醇浓度50%,料液比为1∶20(g∶m L),温度45℃。在上述提取条件下,杜仲叶总多酚的得率达到了6.77%,在不加入表面活性剂的情况下,得率为5.99%。2、杜仲叶总多酚提取物体外抗氧化活性评价。采用上述优化的最佳工艺、水提取工艺和超声波-微波提取工艺制备三种杜仲叶总多酚提取物(EUE-SDS、EUE-W和EUE-45Et OH),以Vc为对照品进行对比,进行羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和还原力的测定,考察不同提取物的体外抗氧化能力。试验结果表明,三种杜仲叶总多酚提取物具有羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和还原力能力。其中羟自由基清除能力Vc>EUE-SDS>EUE-45Et OH>EUE-W,DPPH自由基清除能力Vc>EUE-45Et OH>EUE-SDS>EUE-W,ABTS自由基清除能力Vc>EUE-SDS>EUE-45Et OH>EUE-W,还原力能力Vc>EUE-45Et OH>EUE-SDS>EUE-W。3、杜仲叶总多酚提取物体内抗氧化活性评价。以生理盐水为空白组,抗坏血酸(Vc)为阳性对照组,进行健康KM小鼠灌胃,42 d后测定小鼠脑、肝和血清中MDA含量、SOD活力和GSH-PX活力。Vc组、EUE-W组、EUE-45%Et OH组、EUE-SDS组相对于空白对照组肝组织的MDA含量分别降低了27.44%、24.13%、21.63%、28.37%,脑组织的MDA含量分别降低了17.48%、0.90%、15.33%、11.29%,血清的MDA含量分别降低了15.43%、5.00%、19.90%、11.36%。肝组织中的SOD活力分别提高6.41%、10.49%、7.74%、8.72%,血清中的SOD活力分别提高9.60%、13.6%、7.74%、22.30%,脑组织中的SOD活力分别提高5.38%、1.01%、7.70%、2.70%。肝组织中的GSH-PX活力分别提高40.41%、27.75%、39.27%、26.48%,脑组织中的GSH-PX活力分别提高9.52%、57.02%、30.00%、6.10%,血清组织中的GSHPX活力分别提高23.60%、12.60%、43.45、18.43%。4、杜仲叶总多酚提取物对酪氨酸酶活性作用初探。通过三种杜仲叶总多酚提取物对酪氨酸酶活性的初步探究表明,三种杜仲叶总多酚提取物对酪氨酸酶均具有抑制作用,随着杜仲叶总多酚提取物浓度的增加,对酪氨酸酶活性的抑制效果提高,EUESDS相对于EUE-W和EUE-45Et OH对酪氨酸酶的抑制效果更好。实验浓度范围内最高抑制率分别为41.90%、34.30%和33.40%。