【摘 要】
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钙离子非依赖型磷酸酯酶A2,VIA亚型(iPLA2-VIA)是人体内一重要的酶类,它们通过催化磷脂二位酰基水解而产生花生四烯酸和溶血磷脂。本研究应用免疫组织化学染色,免疫荧光染色
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钙离子非依赖型磷酸酯酶A2,VIA亚型(iPLA2-VIA)是人体内一重要的酶类,它们通过催化磷脂二位酰基水解而产生花生四烯酸和溶血磷脂。本研究应用免疫组织化学染色,免疫荧光染色和Western Blotting等方法,在国际上首次发现了iPLA2-VIA在正常人眼中及ARPE-19细胞株中有大量表达,并明确了其表达定位。视网膜色素上皮细胞(RPE)吞噬光感受器外节盘膜(POS)是视网膜维持视觉功能的一个重要过程。目前RPE细胞吞噬降解POS能力的降低被认为是老年性黄斑变性(AMD)的主要病因,而POS的主要成分是磷脂——iPLA2-VIA的作用底物,于是我们建立了ARPE-19细胞株的吞噬模型,利用Western Blotting、酶活性测定方法、酶特异性抑制剂和细胞转染等实验方法,证明了iPLA2-VIA参与并且促进RPE细胞的吞噬过程。继而,我们又建立了小鼠RPE细胞的原代培养及吞噬模型,应用iPLA2的特异性抑制剂和细胞转染等方法再次证明了iPLA2-VIA在RPE细胞吞噬过程中的参与和正性调节作用。我们认为iPLA2-VIA可以增强RPE细胞的吞噬功能,对于光感受器细胞的更新和良好视力的维持起到重要的作用。本文的创新点在于,首次发现了iPLA2在眼部的高表达,并且经过多角度论证继而提出iPLA2在RPE细胞吞噬POS过程中发挥重要调节作用。这一结论对我们理解AMD疾病中RPE细胞的病理变化,以及为临床治疗AMD提供了有价值的实验支持。此类研究国际及国内尚未见任何报道。
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