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本论文主要进行了以下两个方面的研究：1.ApxlA基因的克隆和表达:
本试验根据APXⅠA的特性，分别对其N端疏水功能区和C端Ca2+结合区进行克隆和表达。本试验从血清10型APP中提取菌体DNA，采用PCR技术扩增得到APXⅠA的N端疏水功能区和C端Ca2+结合区基因，分别将其克隆到pGEM-Teasy载体中，经酶切鉴定和测序后克隆进原核表达载体pET-32a中，将重组表达质粒转化BL21(DE3)，在IPTG诱导下表达约58kd和79kd的融合蛋白，SDS-PAGE电泳和Westernblotting检测证实上述两段基因片段均获得高效表达且表达产物具有免疫学活性。本试验为研究以上两个功能区的生物学活性及在不同毒素中共同的抗原表位奠定基础，也为研究亚单位疫苗和基因工程疫苗提供了新的思路。
2.胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌复合PCR方法的建立:
由于猪的呼吸系统疾病多为混合感染，建立一种快速便捷的检测多种呼吸系统疾病的方法势在必行，所以在试验中进行了复合PCR方法的研究。在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上，通过对扩增条件的筛选，成功地建立了APP、PM、HPS复合PCR诊断方法。利用一次PCR反应，即可同时扩增APP的342bp、PM的457bp和HPS的821bp的特异性片段。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。