番茄病程相关蛋白PR-NP24的表达与调控及毛酸浆PpTLP1基因的克隆

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Nathan_YM
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植物病程相关蛋白(PRs)是植物受到生物或非生物胁迫诱导产生的一类蛋白。其中,PR-5是一类具有抗真菌活性和抗非生物胁迫的作用蛋白。蛋白PR-NP24是PR-5家族中的一种特殊蛋白。本研究蛋白PR-NP24的组织特异性表达特点,植物果实中的表达模式、逆境下的诱导表达及茄科植物毛酸浆果实中相关基因。研究结果如下:(1)通过对PR-NP24在不同品种番茄果实的组织特异性表达及质谱鉴定分析,发现PR-NP24在模式番茄Micro-Tom果实或常见品种果实具有组织特异性表达差异。其中,外表皮中表达量最高,而外表皮以外的组织中表达量较低。(2)通过对非生物胁迫下番茄中的PR-NP24的表达研究,发现低温冷藏处理下,番茄外表皮中PR-NP24的表达量未发生显著变化。氯化钠溶液能够显著诱导PR-NP24的表达上调或下调。但外界不同形式的损伤未对番茄PR-NP24的表达产生显著影响。(3)通过灰葡萄孢菌和核盘菌接种番茄试验,发现接种部位PR-NP24的表达量显著下调,而在接种部位对面组织表达也呈下调趋势。通过盐溶液预处理番茄并接种试验发现,诱导并调控PR-NP24的表达影响番茄抗病性。(4)通过数据库中PR-NP24蛋白的比对筛选,对茄科与非茄科果实进行聚类分析及电泳表达检测,发现部分植物中可能存在与蛋白PR-NP24同源性较高的蛋白。其中,茄科植物毛酸浆(Physalis pubescens)中其表达量最高。(5)根据上述结果,对毛酸浆中与PR-NP24同源的基因PpTLP1进行克隆及生物信息学分析,发现该蛋白质具有跨膜螺旋、信号肽、属于糖苷水解酶家族64,并定位于胞外。特别是其具有甜蛋白或类甜蛋白特有的保守结构域,并同时存在四种二级结构。另外,毛酸浆果中PpTLP1蛋白也具有组织特异性表达等特点。植物病程相关蛋白PR-5蛋白具有抗菌与抗非生物胁迫活性,通过以上研究发现蛋白PR-NP24具有组织表达特异性且其表达受到逆境影响,该蛋白广泛存在于植物果实中(如毛酸浆)。本研究为深入研究病程相关蛋白PR5表达及调控模式,及诱导PR-NP24表达以提高植物抗逆性等方面提供理论参考,也为番茄运输与贮藏等方面提供新思路。
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