苦丁茶是我国民间食药两用植物,历史悠久,植物种源繁多,含有多种化学成分,主要包括三萜及甙类化合物、多酚类化合物、黄酮类化合物、氨基酸、香气、挥发油等。熊果酸在冬青科苦丁茶中含量较高,是一种五环三萜类化合物,具有抗癌、护肝、抗菌消炎和抗病毒等生物活性。但由于熊果酸水溶性差,生物利用度低,限制了其在生物医学上的应用。因此本论文运用超声波辅助离子液体法从苦丁茶中提取熊果酸,并对其进行纯化,再利用乳化溶剂蒸发法制备熊果酸纳米粒,考察其理化性质和生物利用度改善情况。运用超声波辅助离子液体法从苦丁茶中提取熊果酸时,首先考察了不同提取溶剂对提取率的影响,接着对影响提取率的主要因素:离子液体浓度、料液比、超声功率、超声温度、超声时间进行单因素优化实验,得到熊果酸提取的最优工艺参数:溴化-辛基-3-甲基咪唑([OMIM]Br)浓度为0.4 mol/L,料液比1:40,超声功率500 W,超声温度40 ℃,超声时间30 min;平均提取率为2.41 ± 0.35 mg/g。利用萃取法对提取物进行初步纯化,得到熊果酸粗提物的含量为29.89 ± 2.23%在反溶剂重结晶法纯化熊果酸的实验中,运用单因素实验,考察粗提物浓度、溶剂与反溶剂体积比、沉积温度、搅拌时间、搅拌速度对熊果酸含量的影响,得到熊果酸纯化的最优工艺参数:粗提物浓度50 mg/mL,溶剂与反溶剂体积比为1:6,沉积温度40°C,搅拌时间1 min,搅拌速度1500 r/min;纯化后的熊果酸含量达到92.18 ±1.87%。结合乳化溶剂蒸发法和冷冻干燥法制备熊果酸纳米粒,此工艺不仅减小了熊果酸的粒径,而且使熊果酸纳米粒转化为无定形态。在实验过程中,选择泊洛沙姆188为表面活性剂和冻干保护剂,利用单因素实验法筛选制备熊果酸纳米粒的最优条件,最优条件如下:泊洛沙姆188的浓度为0.5‰,有机相和水相的体积比为1:4,匀浆速度为7000 rpm,匀浆时间为2 min,均质压力为500 bar,均质次数为6次。在最优条件下制备的熊果酸纳米粒的粒径为157.5 ± 28.0 nm,电位为20.33 ± 1.67 mV。通过扫描电镜(SEM)可知,熊果酸纳米粒的形态近球形,且粒径分布均一;经过X射线衍射(XRD)、热重分析(TG)和示差扫描热量法(DSC)检测,可以确定熊果酸纳米粒的化学结构没有发生改变,但是已经成为无定形态。在溶剂残留实验中,确认了熊果酸纳米药中氯仿和乙醇含量都符合药物注册技术要求国际协会(ICH)的规定。经过与熊果酸原粉进行饱和溶解度、溶出速率对比实验发现,熊果酸纳米粉显示出了更大的饱和溶解度和更快的溶出速率。熊果酸纳米粉的饱和溶解度在人工胃液(SGF)中是熊果酸原粉的13.48倍;在人工肠液(SIF)中是它的11.79倍,在去离子水中是它的23.99倍。另外,通过乳化法制备的熊果酸纳米粉的溶出速率,在SGF中比原粉提高了 14.72倍,在SIF中比其提高了 74.36倍。除此之外,熊果酸纳米粉的抗氧化能力和口服生物利用度也有明显提高,熊果酸纳米粉的EC50值比熊果酸原粉降低了37.5倍,口服生物利用度约为原粉的2.68倍。