前言 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种具有气流受限特征的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展，与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关，其特点是肺泡数量减少，不能为丰富的气体交换提供足够的表面面积。维生素A是一种人体必须的低分子有机化合物，对机体物质代谢和生长发育的调控作用受到人们的重视，其代谢活性物质维A酸(RA)对实验性肺气肿的逆转作用已经被Massaro等人所报告。为明确维生素A及RA对实验性肺气肿的早期干预作用，我们通过弹性蛋白酶气管内滴的方法复制大鼠肺气肿模型，观察RA及维生素A早期干预对大鼠肺气肿形成的影响。 材料与方法 一、实验动物与分组 Wistar雄性大鼠28只，体重(274±23)g，随机分为四组：对照组，模型组，RA组，维生素A组。模型组，RA组，维生素A组用弹性蛋白酶气管内滴复制肺气肿模型：麻醉大鼠，暴露气管，用1ml注射器取弹性蛋白酶生理盐水溶液(5000u／ml)，针头刺入气管滴入药液，2.0u／kg，注入空气保证药液进入，竖起鼠板摇动使药液分布均匀，缝合皮肤，消毒。对照组手术方法相同，气管内滴入等量生理盐水。第二天开始RA组给RA蓖麻油溶液(500βg／kg体重)日一次腹腔注射，维生素A组给维生素A(50000u／kg体重)日一次灌胃，共25天。 二、病理标本制备及免疫组织化学染色 麻醉大鼠，打开胸腔，将一顶端膨大的大号针头插人气管结扎固定，接自制灌注装置，保持＊96kPa水柱压力，10％中性福尔马林灌注肺脏30 min，结扎气管，浸人10％中性福尔马林固定24／J’时以上。每只大鼠左肺最大横径处肺组织常规石蜡包埋切片，HE染色，部分石蜡切片行增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组织化学染色，阳性反应为胞核棕褐色颗粒状。 三、形态学定量分析 应用 MetaMonilfDP10／BX51系统的 Meta MOrth Imager SystemV4石软件进行分析，每只大鼠观测两张切片，每张随机选择八个视野，避开支气管及大、中血管。观察平均肺泡面积（MAAX计数每个视野肺泡数（NaX测出每个视野面积TA，HE染色阳性区面积PA，以 MAA＝（TA－PA）／Na计算每个视野平均肺泡面积；平均内村间隔（MLI人以每个视野正中为中心划“十”字线，计数经此线的肺泡间隔数（NS人测出十字线总长度（L＊以 MLI＝L／NS得到平均内衬间隔。 四JCNA指数：指计数 1000个细胞中 PCNA染色阳性的细胞的数量。计数每幅图像中的正常蓝染的细胞核的数量＊，手工计数PCNA染色阳性的细胞核的数量NZ，每幅图像的PCNA指数一NZ八NI＋NZ厂求均值得出每张切片的 PCNA指数。 五、统计学处理：采用 Microsoft Excel 2000对数据进行双样本异方差假设t检验。 结 果 一、病理改变 大体观察：模型组肺体积明显增大，颜色苍白，表面见多个大 ·二· 小不等的过度充气肺泡，肺弹性减弱，剖胸后不萎缩。RA组大鼠 肺改变不明显，维生素A组有类似改变但不如模型组显著。 光镜观察：模型组肺泡大小不等，结构紊乱，肺泡管、肺泡囊和 肺泡明显扩张，壁变薄，有不同程度的断裂，部分融合成肺大泡。 RA组肺泡大小不均情况轻微，有较多小肺泡出现，肺泡壁断裂和 气腔扩张情况很轻。维生素A组界于模型组和RA组之间。 二、形态学定量分析 模型组平均肺泡面积p745 L 679）pmz，与对照组O t 344…mz比增长 90％以上，平均内衬间隔为阳5．03．23）pm， 较对照组（42．02 t 5．98）卜m变大；RA组平均肺泡面积为江626 t 230）pmz，较对照组增长33％左右，平均内村间隔为K6．35。3， 38）卜m；维生素 A组平均肺泡面积为妇428士 322）pm＼平均内衬 间隔为K8．98。3．80）pm，与模型组比较无显著性差异。 三、PCNA指数分析 对照组PCNA指数为20。4，模型组PCNA指数上升为57 t 6 汀＜o．01人RA组利＊A指数显著升高，与对照组及模型组比较 差异显著神值分别＜O．00且和0对门，维生素A组K＊A指数与 对照组比较有升高，但与模型组比较差异不显著河＞0．05人 讨 论 1997年，Massaro等报告 RA治疗能减轻弹性蛋白酶5！起的大 鼠肺气肿。以后，PaLila等重复了Massaro的研究并通过计算机辅 助图像分析系统对肺泡面积和密度进行了分析，证实RA治疗可 以逆转实验性肺气肿 50％的损害。Tepper等报告 ATRA可以显 著减少肺气肿模型的肺总量和残气量变化，而肺活量没有显著减 少。关于实验性肺气肿的早期药物干预和预防目前缺乏足够研 究。本研究中RA组平均肺泡面积与模型组相比差异显著证实 ·3·M早期干预确实能减轻实验性肺气肿的发生。 维生素A与肺的