多通道鞘流二维光散射流式细胞术及其在肺癌检测中的应用研究

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肺癌是中国乃至全球范围内发病率和致死率最高的癌症。按照治疗和生物学特性,肺癌可分为小细胞肺癌与非小细胞肺癌。目前,肺癌诊断主要依靠组织活检,该方法对医师经验要求高,取材和染色步骤复杂,且具有一定的主观性。常规技术对小细胞与非小细胞肺癌的分类存在一定的分歧。研发一种新型的肺癌诊断方法具有重要的医学价值。无标记二维光散射技术在细胞分析领域具有独特优势,该技术与流式技术相结合可用于单细胞高通量分析。随着微加工技术的发展,小型化微流体细胞仪成为流式细胞仪发展的重要方向。为进一步提高流式测量通量,实现并行检测目的,多通道流式细胞仪逐渐引起人们的兴趣。二维光散射技术与多通道鞘流技术相结合预期可实现肺癌高通量无标记检测。本文通过光片技术,多通道三维水动力聚焦技术,以及无标记二维光散射技术的有机集成,构建了多通道鞘流二维光散射流式细胞术装置,该装置主要包含光片生成模块、多通道三维水动力聚焦模块和散射图样采集与处理模块。光片生成模块将纺锤形截面的激光压缩成片状光束;多通道三维水动力聚焦模块同时形成多个相互独立的聚焦流,提高检测通量;散射图样采集与处理模块采集颗粒或细胞的二维光散射图样并进行分析处理。然后,利用该装置采集了小细胞肺癌细胞系(H69)细胞和人低分化肺腺癌细胞系(SK-LU-1)细胞的二维光散射图样。借助灰度共生矩阵提取的四个特征,论文通过SVM分类器实现了该两类肺癌细胞的自动化分类识别,分类准确率达92.75%。本文研究结果表明,多通道鞘流二维光散射流式细胞术具有无标记、高通量等优势,预期可为肺癌以及其他癌症诊断提供一种新型的检测方法。
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