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目的:探讨益肺消癥合剂对肺癌A549及HCC827细胞增殖、转移的影响以及抗肺癌裸鼠腋下移植瘤转移和EGFR/PI3K/AKT信号通路的关系。方法:1.体外实验:(1)选取肺癌A549及HCC827细胞,以不同浓度的益肺消癥合剂干预,MTT法检测益肺消癥合剂对肺癌A549及HCC827细胞增殖的影响;(2)细胞划痕实验检测益肺消癥合剂对肺癌A549及HCC827细胞迁移能力的影响;(3)Transwell实验检测益肺消癥合剂对肺癌A549及HCC827细胞迁移和侵袭能力的影响;(4)Western Blot检测益肺消癥合剂干预肺癌A549及HCC827细胞后对EGFR/PI3K/AKT信号通路的影响。2.体内实验:(1)选用肺癌A549细胞,建立裸鼠腋下移植瘤模型,将50只荷瘤小鼠分为模型组,益肺消癥合剂低、中、高浓度组,吉非替尼组;(2)给药期间,定期监测各组裸鼠体重及肿瘤大小,密切观察各组裸鼠生理状态,以抑瘤率为指标衡量益肺消癥合剂对荷瘤小鼠生长的抑制作用;(3)HE染色检测益肺消癥合剂对各组肿瘤组织形态的影响;(4)Western Blot检测各组肿瘤组织中EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR蛋白的表达情况及肺癌转移相关E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、MMP9、STAT3、VEGF蛋白的表达情况。结果:1.(1)倒置显微镜显示益肺消癥合剂干预肺癌A549及HCC827细胞后,细胞间连接减少,形态无规则,细胞内颗粒增多,部分细胞变圆、皱缩,甚至破碎、死亡;(2)MTT实验结果显示,益肺消癥合剂对肺癌A549及HCC827细胞有良好增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖性;(3)细胞划痕实验结果显示,与正常组相比,益肺消癥合剂低、高组以及吉非替尼组可显著抑制肺癌A549及HCC827细胞向划痕区移动;(4)Transwell结果显示,益肺消癥合剂低、高浓度组和吉非替尼组穿透过膜的细胞数量较正常组相比明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01);(5)Western Blot结果显示,较正常组相比,益肺消癥合剂低、中、高浓度组及吉非替尼组中p-EGFR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白的表达明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。2.(1)成功建立裸鼠腋下移植瘤模型,各组裸鼠肿瘤质量分别为:模型组1.15±0.25 g,益肺消癥合剂低浓度组0.47±0.29 g,益肺消癥合剂中浓度组0.38±0.09 g,益肺消癥合剂高浓度组0.29±0.04 g,吉非替尼组0.45±0.15 g,各组的抑瘤率分别为59.13%,66.96%,74.78%,62.61%;(2)HE染色结果显示,各组裸鼠肿瘤转移灶分别为:29.3±0.82个,16.6±0.52个,14.8±0.42个,10.2±0.63个,10.5±0.71个;与模型组相比,益肺消癥合剂可减少裸鼠肿瘤肺转移灶数,差异具有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)Western Blot结果显示,与模型组相比,益肺消癥合剂低、中、高浓度组及吉非替尼组p-EGFR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白的表达均明显下调,差异具有显著统计学意义(P<0.01);(4)Western Blot结果显示,与模型组相比,益肺消癥合剂低、中、高浓度组及吉非替尼组N-cadherin、Vimentin、Snail、MMP9、STAT3、VEGF蛋白的表达均明显下调,E-cadherin蛋白的表达上调,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:益肺消癥合剂可抑制肺癌A549及HCC827细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,能抑制裸鼠腋下移植瘤的肺转移,这种作用主要是通过下调p-EGFR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白的表达从而影响EGFR/PI3K/AKT信号通路发挥作用的。