非洲猪瘟（African Swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus）感染猪引起的一种急性,热性,高度接触性传染病。该病死亡率高,病程短,严重危害全球养猪产业,有着重要的社会经济学意义。ASFV的宿主有家猪,野猪和软蜱（钝缘蜱属）,是DNA病毒家族唯一一种节肢动物传播的病毒。目前ASF尚无有效的疫苗,防控措施以加强检疫检测、严防病毒侵入为主。该病于2018年8月进入中国,并在全国范围内迅速蔓延,给我国养猪业造成重创。因此,开发筛选合适的疫苗株和检测方法对于ASF的防治具有重大意义。1.非洲猪瘟外膜蛋白CD2v多抗的制备与免疫学检测ASFV基因组含有180多个阅读框,可编码150～200种蛋白质,其中CD2v蛋白由ASFVEP402R基因编码,蛋白胞外区序列与哺乳动物（比如人）的CD2具有较高同源性,在受感染的动物细胞中发现它能介导红细胞与感染细胞或病毒颗粒结合,引起红细胞吸附现象。CD2v属于ASFV晚期表达蛋白,在ASFV感染的细胞中可检测到三种不同大小的蛋白,分别为89 kDa的全长糖基化蛋白,26 kDa的C末端非糖基化片段,蛋白水解作用产生的63 kDa大小的N-末端糖基化片段。本部分通过对ASFV的CD2v基因初步分析,构建表达CD2v各截短体的重组原核表达质粒,表达重组蛋白并纯化以制备多克隆抗体。制备的多克隆抗体可检测到plenti-CD2v、pShuttle-EP153R-EP402R质粒在293T细胞中的暂态表达。共聚焦结果显示:多克隆抗体可在病毒感染肺泡巨噬细胞12 h,24 h后检测到CD2v表达于细胞质病毒工厂附近。本部分研究可为今后开展CD2v蛋白的血清学诊断技术及其生物学功能研究奠定基础。2.非洲猪瘟CD2v缺失株感染猪骨髓细胞的转录组学分析应用高通量测序技术分析ASFV SY18毒株和SY18ΔCD2v分析感染猪骨髓细胞不同时间点下的转录组学变化。结果表明,参考目前已知的猪的基因组序列数据库,共测出碱基数6060458700 bp,鉴定出SY18和SY18ΔCD2v感染BMDM的mRNA个数分别是23067和22341。与未感染组相比,SY18和SY18ACD2v感染后8h显著变化的mRNA分别为1322和823个,感染16h分别为2015和1295个。同一感染时间下,与SY18感染组相比,SY18ΔCD2v显著变化的mRNA在感染8h为115个,16h为169个。同一毒株感染8 h和16 h显著变化的mRNA数量SY18为779个,SY18ΔCD2v为512个。利用生物信息学技术,对各组差异显著的mRNA进行了 GO功能注释和KEGG生物通路富集分析。结果显示,ASFV感染激活Ⅰ型干扰素通路,干扰素通路相关免疫分子（DDX58/RIG-I、MX1、UBE2L6、STAT2等）、趋化因子（CCL5、CXCL11、CCR5 等）、炎症反应相关因子（TlMP1、CD47、MMP3 和 THBS1等）均上调表达;PLAU、F8、SERPIND1等基因下调表达。利用qRT-PCR验证上述转录组学分析结果,上述基因表达趋势和转录组结果相近,说明RNA-seq测序结果可信。