阿替洛尔对人血管瘤内皮细胞增殖与凋亡的影响

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目的:婴儿血管瘤是婴儿最常见的良性肿瘤。2008年发现普萘洛尔可以治疗血管瘤以来,目前普萘洛尔已成为血管瘤的一线治疗药物,但是普萘洛尔是非选择性的β受体阻滞剂,有气道高反应性、低血糖、高钾血症、腹泻等不良反应,阿替洛尔作为高选择性的β受体阻滞剂,能有效的避免β2受体所带来的不良反应,阿替洛尔有望替代普萘洛尔用于治疗婴儿血管瘤,但目前尚缺乏对其机制的充分研究。本课题主要通过研究阿替洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖和凋亡的影响,从而探讨阿替洛尔治疗婴儿血管瘤的机制。方法:阿替洛尔的药物作用效果实验:体外培养婴幼儿的血管瘤内皮细胞(HemEC),同时培养脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照组。用不同浓度的阿替洛尔处理上述两种细胞(0μmol/L;18.75μmol/L;37.5μmol/L;75μmol/L;150μmol/L;300μmol/L),作用时间为24小时和48小时,然后采用MTT实验来检测两种细胞的存活率。根据存活率改变最大的时间点,作为流式细胞仪检测细胞凋亡的时间点,再采用相同的方法处理HemEC,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:1.(1)在作用24h和48h,阿替洛尔的浓度在0μmol/L-75μmol/L之间,可轻微抑制HemEC的增殖,但无统计学意义(P>0.05),浓度在0μmol/L-150μmol/L之间,可轻微抑制HUVEC的增殖,但无统计学意义(P>0.05);在浓度≥75μmol/L时,可引起HemEC存活率的明显下降,特别是在浓度≥150μmol/L时,明显可见大量细胞变圆,漂浮,浓度≥300μmol/L时,可引起HUVEC存活率的明显下降(P<0.001),可见大量细胞变圆,漂浮。在24h和48h时,在一定范围内,与浓度呈现负相关(P<0.05)。(2)阿替洛尔浓度在75-300μmol/L之间,作用时间为24小时-48h小时,HemEC与HUVEC相比,阿替洛尔的抑制作用更加敏感,细胞存活率下降更加明显(P<0.05)。2.(1)当阿替洛尔的浓度为在0μmol/L-75μmol/L时,HemEC的总凋亡率的变化无统计学意义(P>0.05),当阿替洛尔的浓度≥75μmol/L时,HemEC的总凋亡率升高(P<0.05),特别是当浓度为300μmol/L时,总凋亡率明显升高(P<0.001)。(2)当阿替洛尔的浓度在75μmol/L-300μmol/L时,能引起HemEC的凋亡,且和药物浓度呈正相关(P<0.05)。结论:1.低浓度的阿替洛尔对HemEC和HUVEC的增殖无明显作用;高浓度的阿替洛尔对HemEC及HUVEC的增殖有明显的抑制作用,且在一定范围内与浓度呈负相关,但作用时间的改变无明显差异,阿替洛尔对HemEC的抑制作用相较于HUVEC更加敏感。2.低浓度(<75μmol/L)的阿替洛尔对HemEC的凋亡无明显改变;高浓度(≥75μmol/L)的阿替洛尔对HemEC的凋亡有明显的促进作用,且在一定范围内和浓度呈正相关。3.阿替洛尔抑制血管瘤增长的作用机制可能与促进HemEC凋亡相关。
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