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流感病毒是具包膜的病毒,A型流感病毒常以流行的形式出现,可造成世界性大流行。历史上每次流感大流行都给人类健康和社会经济带来灾难,究其主要原因是由于表面抗原发生变异,因此有必要对病毒表面结构进行精细研究。本文利用原子力显微镜对A型流感病毒形态进行了研究。第一部分;目的;利用AFM和TEM观察A型流感病毒表面形态,探讨AFM在病毒表面形态研究中的应用。方法;TEM采用磷钨酸负染方法,AFM采用轻敲模式在大气常温下扫描成像,并对主要指标长度(直径)、Ra、Rq等进行测量。结果;A型流感病毒呈球状、丝状等多种形态。TEM提供了病毒二维图像,表面可见钉状突起,AFM则呈现了病毒三维图像,相位图可见病毒表面有凹凸不平的特征和边缘有齿轮状的突起,同时获得表面粗糙度等可以量化指标。第二部分;目的;用AFM观察病毒与表面活性剂作用的形态,通过对比不同表面活性剂对病毒表面结构的破坏效果,筛选出一种有效的表面活性剂及其使用浓度。方法;用AFM观察病毒与NP-40、EDTA等作用后的形态。结果;NP-40各浓度对病毒表面结构破坏程度不一,病毒随NP-40浓度增高而逐渐降解;EDTA对病毒表面的破坏程度不如NP-40明显,有规律。第三部分;目的;用AFM和TEM观察完整病毒以及NP-40作用的病毒与不同血清结合情形,从免疫学角度判断NP-40对病毒表面结构的作用效果,并探索以原子力显微镜为工具的A型流感病毒的免疫检测方法。方法;用AFM和TEM观察完整病毒以及NP-40作用的病毒的形念以及病毒与不同血清结合后的形念,并测量直径、粗糙度等表征参数。结果;通过AFM获得了病毒与不同血清结合后的形貌图和表征参数值。AFM显示血清对病毒的大小有影响,病毒的直径明显增大。而TEM显示完整病毒与H1N1免疫鼠血清结合后,出现凝集现象。0.05%NP-40作用的病毒与H1N1和FN蛋白免疫鼠血清结合后,均出现凝集现象。比较0.05%NP-40作用的病毒和完整病毒与血清的结合情况,NP-40对病毒的表面结构以及抗原抗体的结合均产生了一定影响,病毒的表面粗糙度增大,而捕镜拇笮∶挥蟹⑸浠Ｒ虼?表面粗糙度指标可以作为NP-40影响病毒表面结构和抗原抗体结合活性的衡量标准。而病毒的直径可以作为原子力显微镜免疫检测的指标。