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医学研究证明，肿瘤的生长、转移及预后与肿瘤组织内血管新生密切相关。血管新生是指从现成的血管网络中以出芽的方式，生长出新的血管。血管新生涉及血管内皮细胞的活化、迁移，基底膜的降解，血管管腔的形成等一系列十分复杂的过程，此过程受血管新生诱导因素和血管新生抑制因素的双重调节。 PF4是一种血管新生抑制因子，属CXC趋化因子亚家族。PF4在体外有抑制血管内皮细胞增殖的作用，在体内有抑制血管新生的作用。当前对PF4抑制血管新生的作用机制及其结构间的关系仍无定论。本文旨在通过研究全长PF4和PF4氨基末端改构体---p17-70基因的抗血管新生的作用，探索其结构与功能的关系。 首先，从人胎肝中获取总RNA，通过RT-PCR的方法得到PF4全长基因序列。以本室构建的质粒载体PET-32c(含人PF4相关多肽p17-70基因)为模板，PCR扩增得到p17-70基因。分别将PF4和p17-70克隆入逆转录病毒载体中，构建了PF4及p17-70的重组逆转录病毒载体(rRV-PF4和rRVp17-70)。 其次，在建立生产逆转录病毒重组体包装细胞系的过程中，用脂质体介导的方法或／和磷酸钙共沉淀的方法，分别用rRV-PF4和rRVp17-70转染逆转录病毒包装细胞系Ψ2细胞、ΨA细胞、PA317细胞，并对用病毒感染的PA317细胞做G418抗性筛选，建立了稳定的生产逆转录病毒重组体的包装细胞系(PA317-PF4和PA317p17-70)，收获瞬时转染Ψ2细胞和ΨA细胞的病毒上清(Ψ2-PF4、Ψ2p17-70和ΨA-PF4、ΨA-PF4)。收集瞬时和稳定产毒细胞系的病毒上清，测定病毒滴度，病毒滴度在10~3／cfu-9×10~5／cfu之间。 第三，筛选受体细胞系时，选择了在裸鼠体内产生实体瘤且肿瘤细胞本身并不表达PF4蛋白的人头颈部癌KB细胞系作为受体细胞系。在polybrene存在的条件下，用病毒上清成功地感染了KB细胞系，产生了能稳定表达PF4与p17-70蛋白的肿瘤细胞系(KB-PF4和KBp17-