蜂毒素对人前列腺癌DU145细胞的抑制效应及其机制研究

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【目的】近年来国内前列腺癌发病率呈逐年快速增长态势。对于局部和全身转移的进展期前列腺癌患者,目前的治疗策略仍然会给患者及其家庭带来沉重的经济压力和心理负担。因此探索新型、实用的前列腺癌治疗方法,已经成为临床及科研工作中迫切需要关注的问题。生物毒素被广泛应用于中国传统医药,其中相当一部分具有显著的抗肿瘤效果。其中,蜂毒素(Melittin,MEL)作为一种传统抗炎镇痛中药,长期临床应用已经表明其拥有潜在的肿瘤抑制效果。本课题旨在分析MEL在体外及体内对人前列腺癌细胞的抗肿瘤活性及其可能机制。【方法】采用MTT法和平板克隆法检测MEL对DU145细胞的生长的影响,并在透射电镜下观察MEL处理后,DU145细胞形态的变化情况。利用Transwell法分析MEL作用于DU145细胞后细胞侵袭能力的变化。采用流式细胞术观察MEL对DU145细胞细胞周期分布的影响情况。分别运用流式细胞术及TUNEL法观察MEL处理后DU145细胞的凋亡情况。采用Western blot技术检测MEL处理后DU145细胞内相关蛋白表达水平变化情况。最后在裸鼠移植瘤模型中评估MEL的体内抗肿瘤活性并使用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中相关蛋白的表达情况,分析MEL调控DU145细胞生长的潜在效应和相关可能的机制。【结果】MEL能够显著减弱DU145前列腺癌细胞增殖和侵袭能力,并诱导细胞周期停滞,使细胞发生凋亡的比例明显升高。对凋亡相关蛋白表达量的检测进一步证实了上述结果。在蛋白表达水平,MEL显著抑制了PI3K、Akt和m TOR的磷酸化,提示它们在MEL诱导的肿瘤细胞死亡中发挥关键的作用。此外,在裸鼠移植瘤模型中,MEL能够明显抑制肿瘤的生长,并且肿瘤组织的免疫组织化学结果也印证了上述Western blot结果。【结论】MEL能够通过诱导细胞周期阻滞抑制人前列腺癌DU145细胞增殖并促进细胞发生凋亡,其发挥作用的机制可能与调控PI3K/Akt/m TOR通路后进而调节相关蛋白表达有关。
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