一个水稻高杆突变体的初步鉴定以及OsPIPE在拟南芥中的功能验证

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhe073
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水稻不仅是单子叶植物中的模式植物,更是世界上重要的禾本科粮食作物之一。水稻基因组测序的完成,为水稻基因功能的研究提供了基础。本论文主要从水稻T-DNA插入突变体库筛选突变体,进行表型鉴定和基因克隆。367是从T-DNA突变体库中筛选到的一个高杆突变体。在幼苗期,相比较野生型367初生根的数目增加,叶片变长,侧脉数量增加,但是植株只比野生型略高;随着植株生长至抽穗前期,茎节长度明显增加,分蘖增多,成熟种子颗粒增大,但是种子的育性比较差,结实率降低。对叶片的下表皮进行印迹观察发现,367的气孔密度和细胞的数目增加。对367进行表型鉴定,发现高杆表型能够稳定遗传,目前正利用hiTAIL-PCR技术克隆突变基因。随着农杆菌介导的转基因技术在拟南芥和水稻的研究的不断发展,通过这种转基因方法,将水稻或者拟南芥中的同源基因通过超表达或者RNAi表达载体转到不同种属的模式植物中,从而可以深入研究该基因分别在调控水稻和拟南芥的生长发育中的功能。本论文先将OsPIPE(拟南芥PIPE在水稻中的同源基因)超表达,转化拟南芥pipe突变体,发现超表达水稻基因OsPIPE能够使拟南芥pipe突变体茎的长度和叶片的不规则卷曲得到回复。扫描电镜观察转化植株的第3、4叶及以上真叶的表皮扁平细胞形状,表皮细胞边缘突出(10be)的数目和长度均得到回复。然后通过RNAi技术使水稻中正常基因沉默,转化得到一个矮化表型的突变体,实验结果表明OsPIPE基因在调控植株高矮及叶表皮结构上可能执行与AtPIPE相似的功能。
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