乳酸菌为一类重要的益生菌,在畜牧生产中使用既可提高动物的健康水平,又可减少抗生素的用量,对畜牧业健康养殖具有重要意义。乳酸菌可黏附在动物消化道内形成屏障,从而提高动物机体的抗病力。本论文基于前期分离的一株唾液乳杆菌M3具有良好抑菌效果和黏附作用,通过研究M3的体外抑菌作用、环境耐受性及对Caco-2细胞的竞争性黏附,解析M3表面蛋白的黏附性,为M3的竞争性黏附提供理伦依据。研究结果如下:研究M3的抑菌作用时发现,M3对大肠杆菌、沙门氏菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌活性,抑菌效果由强至弱依次为大肠杆菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌;研究M3对盐酸、过氧化氢和溶菌酶的耐受性时发现,M3在pH为1的强酸、30%的过氧化氢和3.5 mg/mL的溶菌酶环境下可存活并生长。用溶菌酶法、PMSF(苯甲基磺酰氟)法和Sarkosyl(十二烷基肌氨酸钠)法提取M3外膜蛋白时发现,添加氯化锂的溶菌酶法效果最佳,蛋白浓度显著高于PMSF和Sarkosyl法(P<0.05);从分离的外膜蛋白中筛选最粗条带进行质谱鉴定,结果为sGAPDH。用大肠杆菌侵染Caco-2细胞,添加M3后发现,M3相比大肠杆菌可显著黏附于Caco-2细胞表面(P<0.05);M3外膜蛋白sGAPDH基因表达水平在大肠杆菌诱导下显著上调(P<0.01);M3可促进Caco-2细胞分泌黏附因子Plg和Mucin,从而促使M3黏附于Caco-2细胞表面,竞争性抑制大肠杆菌黏附到Caco-2细胞表面,发挥抑菌作用。以上结果表明M3具有良好的抑菌效果和很强的环境耐受性,可通过调控自身sGAPDH蛋白表达量和促进Caco-2细胞分泌黏附因子,使M3大量黏附到Caco-2细胞表面,抵御病原菌对Caco-2细胞地侵害。