桉树和柳枝稷除草活性成分的分析鉴定及除草活性评价

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天然产物具有多种生物活性,如抗氧化、抗肿瘤、抑菌、除草活性等。具有除草活性的天然产物大多数是在植物次生代谢过程中产生的,主要包括萜类、黄酮类、生物碱类等。研究这些天然产物的除草活性可以为天然除草剂的开发提供研究基础和技术支持。天然除草剂具有来源丰富、安全、高效、易降解和不易产生抗性等优点。关于桉树和柳枝稷除草活性的研究已有文献报道,但其除草活性成分的系统筛选与鉴定报道较少,分析鉴定其除草活性成分有助于更好地开发这两种植物的潜在应用价值。因此,本论文围绕桉树和柳枝稷除草活性成分的提取、分析、鉴定和活性评价进行了研究,主要研究结果如下:
  1.采用水蒸气蒸馏法从17个桉树叶样品中提取挥发油,测试了所有桉树油对硬直黑麦草的除草活性,并对其除草活性结果进行主成分分析(PCA)。通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法检测不同桉树油样品的化学成分,并对其GC-MS分析结果进行PCA分析,建立了一种快速筛选除草活性化学成分的方法。通过测试几个代表性化学成分的除草活性,验证了该方法的可行性,并发现反式-松香芹醇和α-松油醇的除草活性较强。
  2.采用培养皿实验和盆栽实验测试了α-松油醇对反枝苋种子在培养皿中发芽和生长过程的抑制作用以及在土壤中出苗率和生物量的抑制作用。结果表明α-松油醇对反枝苋的发芽率和根芽生长都具有明显的抑制作用,对反枝苋在土壤中的出苗率和地上生物量都具有明显的抑制作用。
  3.采用溶剂逐级萃取法分别制备了柳枝稷根部和茎部水提滤液的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物,采用溶剂逐级提取法分别制备了柳枝稷根部和茎部水提滤渣以及茎部粉末的乙酸乙酯提取物、80%乙醇提取物和水提取物。各提取物的除草活性测试结果表明,柳枝稷的乙酸乙酯提取物除草活性最强,说明除草活性成分易溶解于乙酸乙酯溶剂。
  4.通过检测柳枝稷提取物中黄酮类化合物的特征碎片,建立液相色谱-混合离子阱飞行时间质谱(LC/MS-IT-TOF)快速筛选黄酮类化合物方法。该方法通过自动模式下的多级质谱检测,扫描出黄酮类化合物的特征碎片离子(DFI),并对产生该碎片离子的分子离子峰进行多级质谱检测,推断出黄酮类化合物的裂解路径,从而验证其结构。在柳枝稷提取物中共检测到七种黄酮类化合物(异槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-半乳糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-木糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷)。通过测试几种代表性黄酮类化合物的除草活性,发现其对反枝苋的除草活性不明显。柳枝稷及其化合物的除草活性均有待进一步研究。
  5.采用溶剂提取法分别制备了两个柳枝稷品种Alamo和Cave-in-Rrock的根部、茎部、叶部及根际土壤的乙酸乙酯提取物,采用连续性根分泌物收集系统法(CRETS)提取了柳枝稷的根系分泌物。GC-MS化学分析结果表明,Alamo品种柳枝稷各提取物的共有化学成分为苯甲酸,Cave-in-Rrock各提取物的共有化学成分为苯甲酸和香草醛。除草活性测试结果表明,苯甲酸对反枝苋的发芽和生长具有明显的除草活性。
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