目的:研究家蝇幼虫围食膜蛋白MdPM-17分子特点及生物学特性。方法:用RT-PCR方法从家蝇cDNA中获取MdPM-17基因,运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白序列进行预测和分析;构建原核表达质粒pET-32a(+)-MdPM-17,在大肠杆菌Transetta(DE3)中诱导表达并进行纯化,纯化产物经免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;利用几丁质结合实验检测重组蛋白的几丁质结合特性。对家蝇幼虫MdPM-17基因进行RNA干扰,探索最佳干扰时间及效果,通过实时荧光PCR方法检测防御素defensin、天蚕素cecropins、双翅肽diptericin等抗菌肽基因的表达变化情况,研究MdPM-17基因干扰后抗微生物感染反应。结果:成功克隆MdPM-17基因,MdPM-17基因全长635 bp,其ORF长477 bp,编码158个氨基酸,理论分子量为17 kDa,等电点为4.55,蛋白质的N端含有一段信号肽,结构预测分析显示其包含几丁质Ⅱ型结构域。RT-PCR检测显示MdPM-17在家蝇幼虫脂肪体、前肠、中肠、气管以及马氏管中均有表达,其中在中肠的表达量最高。双酶切及SDS-PAGE电泳结果表明成功构建了pET-32a(+)-MdPM-17重组质粒并表达目的重组蛋白。几丁质结合实验表明MdPM-17蛋白具有几丁质结合活性,并只能够被强变性剂6M尿素洗脱,属于PM第三类蛋白。RNA干扰家蝇MdPM-17基因,结果显示在注射MdPM-17dsRNA后24 h达到有效沉默,MdPM-17基因沉默后家蝇幼虫的存活率及化蛹率降低。RNA干扰MdPM-17基因后,抗菌肽基因(defensin、cecropins、diptericin)的表达均较对照组升高;微生物感染后抗菌肽基因的表达各有差异,大肠杆菌感染时,cecropins、diptericin的表达较对照组高;金黄色葡萄球菌感染时,defensin、cecropins、diptericin的表达较对照组高;白假丝酵母菌感染时,diptericin的表达较对照组高。结论:成功构建pET-32a(+)-MdPM-17重组质粒并获得纯化重组蛋白。MdPM-17具有几丁质结合活性,属于第三类围食膜蛋白。MdPM-17基因在家蝇幼虫的中肠组织表达量最高;RNA干扰后MdPM-17基因在24 h时达到有效沉默,并且使抗菌肽基因的表达升高。微生物感染后MdPM-17 RNAi组的抗菌肽基因的表达各有不同程度的代偿性上调,表明MdPM-17在家蝇幼虫肠道免疫调控中发挥重要作用。