目的：建立骨髓增殖性疾病（MPD）JAK2V617F基因突变敏感特异的检测方法。方法：选择2009年5月-2010年5月在大连医科大学附属二院血液科确诊的25例MPD患者作为研究对象，MPD患者包括真性红细胞增多症（PV）13例，原发性血小板增多症（ET）10例，原发性骨髓纤维化（IMF）2例，健康对照10例为我院健康志愿者。提取外周血单个核细胞的基因组DNA，其定量后于-20℃存储。通过对照引物PCR，检测基因组DNA，扩增出预期为191bp的目的条带即表明其可以作为ACB-PCR和直接测序的模板。以MPD患者和健康志愿者基因组DNA作为模板，利用ACB-PCR法扩增出包括苯丙氨酸所编码JAK2V617F突变蛋白的139bp特异性目的条带，将该特异性条带胶回收纯化后进行DNA测序，通过比较ACB-PCR法和DNA测序的结果，确定特异敏感的JAK2V617F基因突变检测方法。结果：25例MPD患者中有17例为JAK2V617F突变阳性，其中包括11例PV，5例ET，1例IMF。DNA测序有68%为阳性，而ACB-PCR阳性率是100%；10例健康人DNA测序全部为阴性，而ACB-PCR阳性率是100%。结论：ACB-PCR法检测JAK2V617F基因突变假阳性率高，直接测序法是检测JAK2V617F基因突变的金标准。