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肾上腺素是哺乳动物的中枢神经系统中一种重要的神经传递物质,其在人体内含量的多少直接维系着人体是否健康,以它作为主成分的注射液作为麻醉剂被广泛应用于临床。由于含邻苯二酚结构它极易被氧化,因此肾上腺素和其代谢产物的测定方法研究在临床医学和生理机能上的意义非常大。高效液相色谱.电化学检测法是研究神经递质及其自然代谢产物的最实用、最具代表性的方法,化学修饰电极(CMEs)可以解决肾上腺素在裸固体电极上电子传递速率低和易受干扰的问题,也可以被用作液相色谱电化学检测器中的工作电极,大大拓宽了该技术的应用。本工作旨在研究测定肾上腺素及其代谢产物的液相色谱电化学联用方法、电化学传感器,并应用于肾上腺素注射液的含量测定。本论文的工作主要包括两部分:
1.首次建立了测定利多卡因肾上腺素注射液中肾上腺素(EP)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素红及亚硫酸肾上腺素的反相HPLC-ECD方法。优化了各物质的最佳色谱条件,其中EP、NE和亚硫酸肾上腺素用氧化模式检测,因肾上腺素红是肾上腺素的最终氧化产物,其测定采用还原模式,各物质所测定的标准曲线R2均为0.9999且RSD均小于9%。该方法被成功用于利多卡因肾上腺素注射液中主成分和代谢产物的检测,结果呈现出良好的线性关系、精密度、选择性、准确度且费时较短,可以用于分析测定肾上腺素及其相关物质。
2.先用经典Hummers法制得氧化石墨(GO)烯,将其适量分散液(3μL)滴涂于裸玻碳电极,自然干燥后得到氧化石墨烯/玻碳电极(GO/GCE)。设置不同的扫描圈数和还原电位,利用循环伏安法(CV)电化学还原上述电极,使电极表面GO烯的含氧基团(-COOH、-OH、-C=O、C-O-C)被不同程度的还原,由此可得含不同数量和种类含氧官能团的ERGO/GCE电极,并用可逆体系Fe(CN)63-/Fe(CN)64-为探针表征了以上被还原程度不同的ERGO/GCE的电化学行为,探究了EP在这些修饰电极上的不同电化学响应,建立了测定EP的新型化学修饰电极法。结果表明:在GO/GCE被还原圈数为5圈、阴极还原电位为-1.7V时,所得电极对肾上腺素的催化性能最佳;在0.05mo/L磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)中测定肾上腺素的线性范围为5.0×10-5~3.5×10-3mol/L,相关系数为0.9997,检出限为3.4×10-6mol/L;回收率在96.4%~104.5%之间,且电极表现出良好的稳定性和较高选择性。最后将修饰电极测定实际样品盐酸肾上腺素注射液中EP含量,所得结果较好。