基于干法筛分的亚麻籽粕中环肽分析及制备工艺研究

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亚麻籽是我国重要的油料作物,亚麻籽油对人体有着较高的营养价值。近年来随着“少吃油吃好油”理念的推广,对市场上亚麻籽油的需求日益增长。亚麻籽粕是亚麻籽榨油后的副产物,是其营养成分亚麻籽环肽及亚麻木酚素的主要来源。而目前对于亚麻籽粕的应用,仍然处于粗放阶段,以饲料用途或废弃为主。通过对亚麻籽粕进行物理筛分后,可大幅度降低亚麻籽粕中营养成分制备的难度,且筛分后的亚麻籽粕仁可作为亚麻籽环肽制备的理想原料。本研究通过对原料筛分,分析测定方法优化及制备工艺等关键环节进行研究,实现从亚麻籽粕仁中制备副产品环肽,为亚麻籽粕中环肽的绿色提取以及产品增值加工提供了一定的理论和数据支撑。本论文研究内容包括:(1)本研究采用干法逐级筛分对粉碎的亚麻籽粕进行不同目数(60目、80目、100目)条件下的壳仁分离,通过采用SEM(Scanning Electron Microscope)电子扫描电镜、EDS能谱法(Energy Dispersive Spectrometer)、SPX法(X-ray photoelectron spectroscopy)、FTIR法(Fourier Transform Infra Red)、FHSI技术(Fluorescence Hyperspectral Imaging)等手段对冷榨亚麻籽粕大、小颗粒(壳、仁)进行表征。在80目筛分条件下,SEM法观察亚麻籽粕壳仁形貌,发现亚麻籽粕壳呈干枯状堆叠在一起,而亚麻籽粕仁呈现油体的光滑性,说明亚麻籽粕的不同部位的组成成分特征差异明显。半定量EDS能谱法及XPS法两者结果均表明亚麻籽粕壳组成成分由C、O、K、Mg、Ca五个元素组成,比亚麻籽粕仁中多了Mg元素及Ca元素。干法逐级筛分通过不同分析手段结果表明:该方法可实现亚麻籽粕壳、仁的有效分离,操作步骤简单、产品的综合回收率高、可行性强、适合工业化推广。80目筛分条件下亚麻籽粕壳仁分离比例为6:4,可以保证小颗粒中粕仁的含量与筛分效率,因而合适作为提取亚麻籽粕中环肽的原料。(2)研究了以14种亚麻籽混合环肽标品为原料进行亚麻籽环肽的HPLC快速分析方法的测定。结果表明以Kinetex~?Phenyl-Hexyl LC Column(150×4.6 mm,2.6μm)为色谱柱,梯度洗脱程序为乙腈体积分数从40%以5%/min升至90%,流速1 m L/min,进样量5μL为最佳液相分析条件。在该条件下,色谱峰型较好,平均分离度为1.65,分析效率为10.86,总分析时间为9.09 min。较前人报道环肽提取时间缩短2/3,不存在色谱峰重叠,是分析测定亚麻籽环肽组成及相应含量高效、合适的液相条件。(3)通过两步法对亚麻籽粕中环肽进行提取制备。对比四种不同的预提溶剂,进一步考察其对80目筛分条件下获得的粕仁预提物提取率、粗环肽的提取率及环肽粗提物氧化程度的影响。其中预提物提取率由高到低依次为:95%乙醇、石油醚、丙酮、6号溶剂(工业己烷)。粗环肽提取率由高到低依次为:丙酮、95%乙醇、6号溶剂、石油醚。对环肽粗提物氧化程度最低的是95%乙醇。通过对料液比、提取时间及提取温度的优化,得出以最优的预提条件为料液比为1:14,提取时间为1 h,提取温度为70℃,预提物提取率为19.30%。通过对已报道的多种亚麻籽环肽提取方法(直接溶剂浸提法及双相萃取)进行对比优化,获得最优的亚麻籽环肽提取方法条件为:2 g粕油,4 m L甲醇水(6:4),涡旋5 min,实验重复三次后提取合并上清液,最终使用湿润滤纸过滤。该条件下提取的粗环肽重量为6 mg,提取率为0.29%,得率为96.29%,蛋氨酸的含量为86.45%。结果表明,基于80目筛分条件下的亚麻籽粕仁为原料,将优化后的两步法进行亚麻籽环肽提取,具有绿色环保,工艺相对简单等优点,可作为未来合适的亚麻籽粕中制备亚麻籽环肽的工艺。
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