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本研究应用RT-PCR方法，从马肝中扩增了两种马肝醇脱氢酶同工酶基因(hladh—e和hladh—s)，并先后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a、pET20b(+)、pkk223—3、pTrc99a上，进行表达研究。对菌体内表达的两种马肝醇脱氢酶同工酶(HLADH—E、HLADH—S)的活性进行了研究。另外，由于本研究克隆的基因来源于马肝，所以尝试将两基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上，在酵母中进行了马肝醇脱氢酶基因表达的初步探索。
将扩增得到的hladh—e和hladh—s通过同源性比较发现，它与文献报道的hladh—e和hladh—s序列存在一个碱基的差异，但是氨基酸序列分析结果表明与文献报道的序列一致。将该基因先后克隆到各种表达载体上，构建成一系列重组质粒pLY105E/S、pLY106E/S、pLY107E/S、pLY108E/S、pLY109E/S、pLY110E/S和pLY115E/S。对这些重组质粒进行表达研究，结果表明在E.coliBL21(DE3)pLY109E/S中表达的重组蛋白HLADH—E/S可溶性效果最好。当菌体在LB培养基中于30℃振荡培养到OD600大约0.6时，用终浓度1mmol的IPTG诱导4h，可获得HLADH—E/S的高效表达。HLADH—E/S产量占菌体可溶蛋白的20％左右。
对菌体的可溶性部分进行了处理，用镍柱纯化HLADH—E/S。对纯化后的HLADH—E/S活性进行研究，通过实验确定了最佳的反应温度、时间、底物浓度和辅酶浓度。该酶纯化后活力达到1.04x103U/mg，有望应用于工业化生产。