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单引物PCR是一种只用一条引物就可以克隆已知序列侧翼未知区域的染色体步移方法。它利用引物在低严谨条件下会与模板发生错配结合的特性，使一端引物与已知序列退火，而另一端引物则与未知侧翼区的部分相似序列退火来实现完整的PCR扩增。为了研究引物的长短对扩增效率的影响，分别设计了三组长为6、8、10碱基的短引物以及一组19和22碱基的长引物，以甘蓝型油菜基因组DNA为模板进行单引物PCR扩增，用电泳检测扩增产物并割胶回收较明亮的条带，再用巢式PCR鉴定扩增产物和回收产物。电泳结果显示，通过低严谨扩增、两步法扩