论文部分内容阅读
HGF/c-Met信号传导通路是众多酪氨酸激酶信号通路中的一个重要分支,研究表明其在多种肿瘤组织中呈现异常的高表达,且与肿瘤的侵袭性、转移性等密切相关。相对于传统治疗手段的高复发性的弊端,分子靶向治疗则具有定位定向、减少用药剂量、提高治疗效果和减少毒副作用的优点。因此开发以c-Met为靶点的小分子抑制剂成为癌症治疗领域的一个重要的策略。本论文通过总结classⅡ型小分子c-Met抑制剂的构效关系的基础上,保留5-原子片段的特征并以活性结构三氮唑和哒嗪酮修饰。对于喹啉母核部分则采用生物等电子等排体、骨架跃迁等原理替换为吡咯并嘧啶、吡唑并嘧啶和噻吩并嘧啶。最终得到97个未见文献报道化合物。所有目标化合物的结构由1H NMR和MS等谱图确证,部分化合物的结构经13C NMR确证。采用MTT法,以A549、MCF-7和HepG2为测试细胞株,以Foretinib为阳性对照药,对所合成的97个目标化合物进行了细胞毒性活性测试。结果表明:这些化合物对HepG2细胞株具有良好的选择性,其中24个化合物对一种或多种肿瘤细胞株显示较好的抑制活性,优于Foretinib或与其相当。其中对化合物WLX-9（c-Met:790 nM）、WLX-58（c-Met:16 nM）和WLX-91（c-Met:19 nM）进行了c-Met、Flt-3、VEGFR-2、c-Kit和EGFR酶抑制活性测试。结果表明,它们对c-Met激酶呈现中等至优越的抑制活性,同时表现优越的c-Met激酶选择性。此外最优化合物WLX-58和WLX-91的吖啶橙（AO）染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞凋亡测试,表明它们可以诱导HepG2细胞早期凋亡并呈现浓度依赖性。这些结果表明,所设计的化合物是一类具有研究价值的c-Met抑制剂。根据化合物的体外抗肿瘤活性结果,对其构效关系进行了初步总结。“5原子”部分对化合物的活性起重要作用;氨基苯氧基上引入氟原子使化合物的活性保持不变甚至增强;母核为噻吩并嘧啶结构的化合物（WLX-36WLX-97）活性总体上优于含吡咯/吡唑并嘧啶结构化合物（WLX-1WLX-35）的活性;其中噻吩母核含6-氧代哒嗪酮侧链的化合物（WLX-64WLX-92）与含三氮唑侧链的化合物（WLX-36WLX-63）活性相当;并且在哒嗪酮系列化合中,6氧代哒嗪酮结构化合物（WLX-64WLX-92）优于含4-氧代哒嗪酮结构化合物（WLX-93WLX-97）的活性;此外,疏水片段上取代基的位置和取代基种类对活性影响较大。本论文对杂环并嘧啶类化合物构效关系及作用机制进行了初步分析及探讨,为今后该类抑制剂的后期深入研究指明了方向。