解有机磷细菌的分离鉴定及其解磷特性研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 28次 | 上传用户:xliang677
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本研究用有机磷固体培养基,从合肥市王小郢污水处理厂的污泥中分离纯化了10株细菌,将这10株细菌接种到有机磷固体平板上培养2天,有6株细菌在有机磷固体平板上生长,且伴有明显透明圈产生,表明这6株细菌具有降解卵磷脂的能力。观察并测定这6株细菌的形态及生理生化性状,初步鉴定菌株S1为微杆菌属(Microbacterium),菌株S2为葡萄球菌属(Staphylococcus), S3菌株为假单胞菌属(Pseudomonas),菌株S4为不动杆菌属(Acinetobacter),菌株S5为黄色单胞菌属(Flavimonas),菌株S6为纤维单胞菌属(Cellulomonas)。观察并测定这6株细菌在有机磷固体培养基上的D/d值及在有机磷液体培养基中的解磷率,菌株S3在有机磷固体培养基上的D/d值为4.5,在有机磷液体培养基中的解磷率为66%。菌株S3为短杆状,单端丛生鞭毛,无芽孢,革兰氏染色阴性,大小为0.5μm×2.0μm,菌落表面光滑,边缘平整,不透明,湿润,呈浅黄色,有臭味。菌株S3生理生化性状:好氧,氧化酶阳性,接触酶阳性,明胶不液化,VP阴性,不水解淀粉。对其16SrDNA序列分析,结果表明菌株S3的16SrDNA基因序列与Pseudomonas alcaligenes AY651925 16S rDNA基因序列相似性最高,同源性达97.4%。通过系统进化树分析并结合形态和生理生化特征,菌株S3属于假单胞菌属产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)。以菌株S3为对象,研究各种理化因子对其生长的影响。菌株S3在液体培养基中的最适培养条件:最适培养温度范围为25~35℃,生长量最高的培养温度为30℃;最适装液量为50ml/250ml,随装液量的增加,菌体的生长逐渐受到抑制;最适初始pH范围为8.0~9.5,耐受极限分别为4.0~4.4和10.5~11.0,在合适的pH范围内,pH对其生长的影响不显著,菌株S3对于环境的酸碱度具有较强的自适应能力和较广的pH适应范围;Mg2+、、Mn2+、Ca2+可以提高菌株S3的生长量,Fe2+对菌株S3的生长有明显的抑制作用,K+对其生长影响不明显;菌株S3以(NH4)2SO4为氮源生长量最高,以亚硝酸钾为氮源生长量最低。正交试验获得最佳培养条件为:装液量100mL/250mL,(NH4)2SO40.5g·L-1,温度30℃,三因素对菌株生长影响的顺序:装液量>氮源>温度对菌株S3在有机磷液体培养基中解磷能力进行了研究。结果表明菌株S3在温度为30℃时的解磷能力最高,上清液中磷酸根离子含量达到9.363 mg/L;在pH值7.5时,溶液中磷酸根离子含量最高,在酸性环境中解磷能力不高,在pH7.5-9.5的碱性环境中解磷能力差异不显著;菌株S3在以NH4+为氮源时表现出较强的解磷能力;装液量50mL/250mL时,磷酸根含量达到8.017mg/L,随着装液量增加,上清液中磷酸根含量减少,解磷能力减弱。以合肥市景观水为培养基,将菌株S1、S2、S3、S4、S5、S6接种到所采水样中,培养5d后,水中的有机磷含量均有所下降。表明这6株解磷菌均有较好的降解水中有机磷的能力。
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