【摘 要】
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目的选取活血化瘀药代表方剂血府逐瘀汤,探究其对果蝇细胞迁移、肿瘤侵袭的影响及其作用机理,为该方预防和治疗肿瘤提供理论指导。方法建立果蝇翅成虫盘细胞迁移模型和果蝇眼睛肿瘤侵袭模型,制备血府逐瘀汤水提物,对上述两种模型进行分组药物干预,分为对照组、模型组和五个不同药物浓度组,药物浓度分别为0.0100g/m L、0.0125g/m L、0.0200g/m L、0.0500g/m L和0.1000g/m
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目的选取活血化瘀药代表方剂血府逐瘀汤,探究其对果蝇细胞迁移、肿瘤侵袭的影响及其作用机理,为该方预防和治疗肿瘤提供理论指导。方法建立果蝇翅成虫盘细胞迁移模型和果蝇眼睛肿瘤侵袭模型,制备血府逐瘀汤水提物,对上述两种模型进行分组药物干预,分为对照组、模型组和五个不同药物浓度组,药物浓度分别为0.0100g/m L、0.0125g/m L、0.0200g/m L、0.0500g/m L和0.1000g/m L,对照组喂食普通培养基,药物组分别喂食含有相应浓度药物的培养基。检测并分析:（1）果蝇翅成虫盘细胞迁移模型中的细胞迁移数量和迁移距离,免疫荧光法检测细胞迁移相关蛋白,包括基质金属蛋白酶-1（Matrix Metalloproteinase-1,MMP-1）、E-钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）和βPS-整合素（βPS-integrin）的表达;（2）果蝇眼部肿瘤的原位分度、迁移部位和迁移率,实时荧光定量PCR检测Notch信号通路的关键因子Suppressor of Hairless（Su（H））的m RNA水平。结果1果蝇翅成虫盘细胞迁移模型的模型组、血府逐瘀汤0.0100g/m L、0.0125g/m L、0.0200g/m L、0.0500g/m L和0.1000g/m L给药组的细胞迁移数量分别为:74.200±25.368、60.550±16.417、42.200±19.509、38.500±16.446、59.150±22.013、102.550±41.087;各组最远迁移距离（μm）分别为:41.438±20.259、28.737±11.830、22.703±9.694、27.674±11.709、43.712±10.562、40.620±15.459;各组中位迁移距离（μm）分别为:14.596±5.129、10.793±3.067、8.919±2.896、10.053±3.392、17.322±4.745、11.840±3.920。与对照组相比,模型组果蝇翅成虫盘细胞迁移数量和迁移距离增加可见统计学显著差异;与模型组相比,0.0125g/m L和0.0200g/m L组翅成虫盘细胞迁移数量减少可见统计学显著差异,0.0100g/m L和0.0500g/m L组无统计学差异,0.1000g/m L组细胞迁移数量增加可见统计学显著差异;与模型组相比,0.0100g/m L、0.0125g/m L和0.0200g/m L组细胞迁移最远距离和中位距离显著降低,0.0500g/m L和0.1000g/m L组无显著差异。2免疫荧光法检测,模型组MMP-1和βPS-integrin表达上调,E-cad表达下调;与模型组相比,0.0125g/m L血府逐瘀汤下调MMP-1和βPS-integrin表达,上调E-cad表达。3果蝇eyeful眼部肿瘤侵袭模型模型组、血府逐瘀汤0.0100g/m L、0.0125g/m L、0.0200g/m L、0.0500g/m L和0.1000g/m L给药组迁移率分别为23.2%、18.1%、18.8%、10.7%、8.7%和24.3%。与模型组相比,0.0200g/m L和0.0500g/m L组果蝇眼部肿瘤迁移率降低可见统计学差异,而0.1000g/m L组迁移率有升高趋势,0.0100g/m L和0.0125g/m L组迁移率无显著统计学差异;各组间肿瘤原位分度和迁移部位占比无显著统计学差异。4与对照组相比,模型组Su（H）的m RNA水平显著升高;与模型组相比,0.0500g/m L组Su（H）的m RNA水平显著降低。结论1血府逐瘀汤对肿瘤转移具有一定的剂量依赖性作用,低剂量抑制肿瘤转移、高剂量促进肿瘤转移。2低剂量血府逐瘀汤抑制细胞迁移,可能是通过调控MMP1、βPS-integrin和E-cad的表达干预细胞上皮间质转化。3血府逐瘀汤抑制肿瘤转移,可能是通过下调Notch信号通路转录因子Su（H）活性实现的。图 12 幅;表 10 个;参 149 篇。
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