孤儿受体GCNF在小鼠附睾中的研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hq520cyj
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GCNF(Germ Cell Nuclear Factor)是一个孤儿受体,属于核受体超家族成员.以前报道,GCNF可能参与精子分化,神经元分化以及胚胎体节和尾芽的发生和形成.编码两个不同大小的转录子(2.3和7.4kb),其序列主要在3-UTR部分差异.其中小转录子组织及发育特异性地高表达于睾丸中,而大转录子分布较为广泛,但表达量很低. 为了分析GCNF在体内的三个转录子是否编码不同的蛋白,制备了抗GCNF蛋白的兔多克隆抗体.幸运地发现一种可以在短时间内(35天)成功制备多克隆抗体的简单方法.利用Western blot分析,在编码三个转录子的睾丸中以及编码两个转录子的附睾中,都可以检测到单一的条带,分子量与预测的GCNF的阅读框架大小相似,为55kD,这表明体内编码的三个转录子可能翻译一个蛋白.利用免疫组化和原位杂交分析,GCNF在附睾中的体部表达最高,两端没有或很低.GCNF在附睾中的特异表达,表明GCNF可能参与精子在附睾中的成熟作用.这为今后研究GCNF在附睾中调控的下游基因提供了方向.
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