视觉电生理学检查技术以测量视觉形成过程中眼的生物电变化为观察指标，从不同角度反映视觉系统在各个水平上的功能状态，具有无创、客观、定量和可重复性等特点，在眼科疾病的诊断、预后判断、疗效评价、视觉功能客观评定等方面具有重要作用。随着科学技术的飞速发展，视觉电生理检查仪器性能的不断提高，检测方法和分析技术也在不断的改进和完善。视觉电生理学检查技术也被广泛用于研究各种因子对动物视觉系统的影响、视觉电生理机制、以及基因和蛋白质功能等方面的研究。但是视觉电生理记录技术比较复杂，影响记录因素较多，加之缺乏标准化的实验方法，致使各种来源的实验结果不便于比较和重复，限制了该技术的推广和普及。本课题基于我们在实验中遇到的问题，主要在以下方面进行了研究：1、常用麻醉药物对大鼠视觉电生理的影响；2、麻醉间隔时间对大鼠视觉电生理的影响；3、氯胺酮对谷氨酸过量引起视网膜损伤的拮抗作用；4、刺激光频率及光强对SD大鼠明适应视觉电生理的影响。第四军医大学硕士学位论文 材料与方法 健康封闭群二级成年雄性SD大鼠，外眼和检眼镜检查屈光间质清晰;麻醉药物:戊巴比妥钠(soluble pentobarbitone);盐酸氯胺酮注射液(ketamine hydroehloride);塞拉嗦(xylazine);速眠新(846);乌拉坦(urethane)。所有麻醉药物由腹腔注射(intraperitoneal illjection，ip)给药，棉拭子测试角膜反射消失C)认为达到全麻状态，麻醉维持时间为由角膜反射消失C)到恢复(+)的时间。肌肉松弛情况通过检查四肢是否有抵抗进行判断。应用裂隙灯照相采集麻醉药物作用后动物角膜、晶体的改变情况;应用肠no一Pen xL(Mentor，Norwell，MA)[2]测量眼压(intraoeular pressure，IOp)改变情况。大鼠玻璃体内注射(intravitreous injection，Ivx)给药。应用我实验室建立的大鼠视觉电生理学实验方法，记录麻醉药物作用后对视网膜、视觉传导通路及视皮层功能的影响。 结果 1.不同麻醉药物对SD大鼠视觉电生理的影响 4种药物麻醉前后大鼠眼内压均有不同程度的改变，其中速眠新和氯胺酮导致眼压升高，戊巴比妥，乌拉坦使眼压降低;麻醉后即刻的大鼠眼前节裂隙灯照片显示4种药物均可以引起角膜水肿，部分出现晶体混浊，麻醉后12h大鼠角膜水肿以及晶体混浊消失。速眠新、乌拉坦、戊巴比妥以及氯胺酮4种麻醉药物都能达到全麻的效果，视觉电生理检查都能得到满意的波型，但麻醉效果不同，视网膜电图(electroretinograph，ERG)和视觉诱发电位(visual evoked potentials，VEP)波形有较大的差异，其中速眠新与氯胺酮达全麻时间短，肌松作用好。在视觉电生理检查中暗适应视网膜电图b波的潜伏期，乌拉坦组最长，氯胺酮组最短;振荡电位O:波幅值，速眠新组最高，戊巴比妥组最低;明适应视网膜电 第四军医大学硕士学位论文图和20 Hz闪烁反应氯胺酮组幅值最高。闪光视觉诱发电位乌拉坦组Pl。。波潜伏期较长，氯胺酮组较短。 2.麻醉间隔时间对SD大鼠视觉电生理的影响 麻醉间隔时间为12，24，48h组的明、暗适应视网膜电图，振荡电位和20 Hz闪烁反应的结果波动很大，而麻醉间隔时间为72h组则与首次麻醉记录的结果相似。再次麻醉后暗适应a，b波潜伏期和幅值发生相似的规律性变化:潜伏期逐渐延长，到72h基本恢复，但是整个过程中变化幅度均较小;02波、明适应ERGb波、20 HZ闪光ERGP波潜伏期和幅值的变化与暗适应a，b波变化非常相似;VEP受麻醉影响没有发现明显的变化趋势。麻醉间隔3d后，视觉电生理的各项指标均已基本恢复到最初水平。 3.氯胺酮对谷氨酸过量引起的视网膜改变的拮抗作用 假实验组、谷氨酸注射组、氯胺酮注射假实验组、氯胺酮干预组暗适应a、b波、OPS 02波、明适应b波以及20Hz闪烁反应b波潜伏期在24h时延长，72h时恢复。谷氨酸注射组改变幅度较其它组大，并且72h时潜伏期较4h时延长，但是氯胺酮干预减弱了谷氨酸的作用，提示氯胺酮对谷氨酸的视网膜毒性影响有拮抗作用;在幅值上72h时谷氨酸注射组最高，其次是假实验组，而氯胺酮注射假实验组和氯胺酮干预组相似。最大反应中a波潜伏期谷氨酸注射组72h较4h显著延长(尸<0.01)，b波幅值在72h时较4h时有明显的升高(尸<0.01)，而对应的氯胺酮干预组没有相同趋势。谷氨酸注射组在振荡电位中O:波潜伏期随时间延长，氯胺酮干预组没有变化，各组幅值在72h时改变不大。明适应b波潜伏期谷氨酸注射组72h时有所延长，假实验组不随时间延长改变，氯胺酮注射假实验组以及氯胺酮干预组潜伏期缩短;幅值72h时谷氨酸注射组最高，其次是假实验组，氯胺酮干预组最低。 第四军医大学硕士学位论文 4.刺激光频率及光强对SD大鼠明适应视觉电生理的影响 刺激光频率及光强对SD大鼠明适应视觉电生理均有不同程度的影响，明适应条件下刺激光参数(频率、光强)的不同引起视网膜电图改