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鬼针草（Bidens bipinnata L.）系菊科鬼针草属一年生草本植物，在我国大多数省区均有分布。鬼针草药用历史悠久，味苦、性平而无毒，具有清热解毒，散瘀消肿等功效，民间常用于治疗痢疾、腹泻、肝炎、胃痛等。鬼针草富含黄酮类化合物，叶中含量高达5％，主要为查耳酮类、噢哢类、黄酮醇类等。本课题组前期发现鬼针草总黄酮（total flavonoids of Bidens bipinnata L.，TFB）是保肝的有效成分，并且对TFB的制备工艺进行了初步研究。但参照按照中药五类新药的要求，中药成分的有效部位含量必须达到50％以上，因此考虑对此工艺进行优化，并进行中试放大研究，为将其开发成为治疗抗肝纤维化的中药五类新药提供实验依据。具体研究内容包括以下二个部分：1.鬼针草总黄酮制备工艺中试研究采用正交实验法对鬼针草总黄酮提取工艺进行优化，确定乙醇提取的生产工艺为用10BV的70%乙醇回流提取2次，每次2h。再通过HPD100大孔树脂吸附纯化，吸附后先以1.5BV的水洗去杂质，再用3BV的70％乙醇进行洗脱，最后用20BV的乙醇超声提取2次。在此条件下进行吸附、洗脱，树脂可重复使用5次。在实验室研究的基础上进行三批中试放大研究，采用比色法测定总黄酮含量>50%，得率为1％。应用HPLC法对鬼针草药材及其连续生产工艺提取物中金丝桃苷，异槲皮苷和鬼针聚炔苷含量进行测定。采用HPLC法，Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），柱温30℃，以0.4%醋酸乙腈溶液和水溶液为流动相进行液相梯度洗脱，检测波长255nm，流速1.0mL·min-1。三种物质在30min内均达到基线分离，线性关系良好（R2>0.9994，n=6），日内精密度≤1.4%。药材及其总黄酮提取物样品溶液中三种成分的平均回收率为99.08%~103.52%，RSD≤3.8%。该法操作简单，结果准确，具有较好的重复性和稳定性。2.TFB质量控制初步研究质量控制是中药研制工作的重点。本文采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色系统，用紫外分光光度法测定了鬼针草总黄酮提取物中黄酮的含量。TFB的含量为57.44％，平均回收率为104.17%，RSD=1.97%。该法简便、快速、重现性好，可用于TFB的质控方法。