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第一部分筛选并构建mir-151a-5p下调的肺癌细胞系目的:首先通过验证mir-151a-5p在肺腺癌组织和不同肺腺癌细胞株中的表达,筛选出表达最高的一株细胞,然后构建mir-151a-5p下调肺癌细胞系。方法:首先将实验分为inhibitor转染组和对照组,其中对照组包含了空白对照和阴性对照。应用RT-q PCR检测mir-151a-5P在16例肺腺癌组织和5株不同肺腺癌细胞中的表达,筛选出mir-151a-5P表达最高的一株细胞,然后用mir-151a-5P-inhibitor转染筛选的细胞株,最后用RT-q PCR验证转染效率。结果:与正常的癌旁组织相比,mir-151a-5p在人肺腺癌组织中的表达明显升高(P<0.01),并且在HBE、H1299、HA549、H1975、H2228五株细胞中,mir-151a-5p在A549细胞株中的表达量最高(P<0.01)。RT-q PCR验证inhibitor转染A549细胞后下调情况,与NC对照组相比,mir-151a-5P-inhibitor实验组的mir-151a-5P表达量显著下降(P<0.01)。结论:mir-151a-5p在肺腺癌组织和肺腺癌细胞中表达升高,并成功筛选和构建了mir-151a-5P下调的A549细胞,为后面的生物学功能实验和化疗敏感性研究奠定基础。第二部分mir-151a-5p调节肺癌细胞的生物学功能和化疗敏感性目的:通过下调mir-151a-5p在A549细胞中的表达,研究mir-151a-5p对肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力以及化疗敏感性的影响,为肺癌治疗提供新的依据。方法:将实验分为inhibitor转染组和NC对照组,用CCK-8实验检测转染inhibitor后A549细胞的增殖能力,Transwell迁移侵袭实验分别检测mir-151a-5P-inhibitor A549细胞的迁移、侵袭能力,然后应用Western blot检测inhibitor转染后EMT相关蛋白:E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Notch1的表达。最后用CCK-8和流式细胞术检测用顺铂处理转染后的A549细胞IC50值和凋亡率的变化。结果:mir-151a-5p inhibitor转染组与NC对照组相比细胞的增殖能力、迁移、侵袭能力都明显降低(P<0.05)。Western blot实验显示mir-151a-5p inhibitor转染组较NC对照组E-cadherin表达明显升高,而N-cadherin、Vimentin、Notch1表达明显下降(P<0.01)。CCK-8测量结果显示mir-151a-5p inhibitor转染组IC50值低于NC对照组(P<0.01)。凋亡结果显示顺铂处理后,mir-151a-5p inhibitor转染组凋亡率高于NC对照组(P<0.01)。结论:下调mir-151a-5p在A549细胞中的表达,能抑制肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并能增加对顺铂的化疗敏感性。