适度游泳运动对2型糖尿病小鼠骨骼肌自噬与糖代谢的影响

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目的:骨骼肌对糖尿病糖代谢起重要作用,本研究采用昆明种小鼠建立2型糖尿病动物模型,探讨适度游泳运动对2型糖尿病小鼠骨骼肌自噬和糖代谢的影响。方法:(1)2型糖尿病小鼠模型的建立:给予高脂高糖饲料和连续两天注射链脲佐菌素(STZ,50mg/kg)的方法建立2型糖尿病小鼠模型,通过观察小鼠体重、饮食量、饮水量、空腹血糖和糖耐量变化来确立建模成功。(2)观察运动对糖代谢和自噬影响:以适度游泳运动为干预方法,将40只昆明种小鼠随机均分为5组:正常对照组、正常运动组、糖尿病组、糖尿病运动组和糖尿病二甲双胍组(每组各8只)。小鼠给予适度游泳运动或二甲双胍灌胃治疗6周。采用糖原试剂盒、HE染色和免疫组化法分别测定小鼠腓肠肌糖原含量、形态学改变和葡萄糖转运体(GLUT4)表达;分别采用Western blot法和实时定量PCR法检测各组小鼠骨骼肌中自噬相关蛋白LC3、P62的蛋白表达和ATG7、P62 mRNA含量。结果:(1)糖代谢结果显示,与正常对照组比较,糖尿病小鼠骨骼肌糖原含量显著降低(P<0.05),肌细胞中GLUT4表达量明显下降;适度游泳运动或二甲双胍干预均可增加糖尿病小鼠GLUT4表达量(P<0.05)。(2)病理形态学结果发现,与正常对照组相比,糖尿病组小鼠骨骼肌细胞形态发生疏松变形,施加适度游泳运动或二甲双胍治疗病理形态明显好转。(3)自噬研究结果发现,与正常对照组相比,糖尿病组小鼠骨骼肌ATG7mRNA表达无显著改变;施加适度游泳运动或二甲双胍后,小鼠ATG7mRNA表达显著下降(P<0.05)。骨骼肌P62mRNA在糖尿病组小鼠的表达显著高于正常对照组;适度游泳运动或二甲双胍治疗能显著下调P62mRNA表达;糖尿病组小鼠LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达比值降低、P62表达增加,给予适度游泳运动或二甲双胍干预能上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和下调P62表达水平(P均<0.05)。结论:(1)适度游泳运动可改善2型糖尿病小鼠骨骼肌细胞糖代谢。(2)2型糖尿病小鼠骨骼肌可能存在自噬下调,适度游泳运动可上调自噬。
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