【摘 要】
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目的:脐带间充质干细胞(UC-MSCs)是存在于脐带华通胶组织中的一种多能成体干细胞,具有自我更新和多向分化能力,还具有重要的免疫调节功能和旁分泌效应。UC-MSCs被广泛用于治疗各
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目的:脐带间充质干细胞(UC-MSCs)是存在于脐带华通胶组织中的一种多能成体干细胞,具有自我更新和多向分化能力,还具有重要的免疫调节功能和旁分泌效应。UC-MSCs被广泛用于治疗各种神经系统疾病。大量数据显示,UC-MSCs能跨胚层分化为神经元和胶质细胞。然而,至今仍缺乏简单有效的方法诱导UC-MSCs形成神经干细胞(NSCs)。为此,本实验采用神经干细胞标准培养基诱导UC-MSCs成球,并进一步探索这些UC-MSCs来源的神经球的生物学特性。 方法:首先分离及培养人脐带来源的间充质干细胞。第二步采用神经干细胞标准培养基(DMEM/F12,EGF,bFGF,B27和N2)诱导UC-MSCs成球。然后利用次级成球实验检测UC-MSCs的自我更新能力。应用免疫荧光染色法检测UC-MSCs来源的神经球的神经分化能力。采用实时荧光定量PCR检测UC-MSCs诱导成球前后相关神经生成基因和干细胞标志基因mRNA的表达情况。接下来应用流式细胞仪检测UC-MSCs诱导成球前后常用细胞表面标志的表达变化。最后通过蛋白芯片检测UC-MSCs诱导成球前后上清液中细胞因子的分泌情况。 结果:脐带间充质干细胞能在12-24h之内被神经干细胞标准培养基(DMEM/F12,EGF,bFGF,B27和N2)有效诱导形成神经干细胞球样结构,这些UC-MSCs来源的神经球能够自我更新形成次级神经球,并能被诱导分化为神经元和胶质细胞。实时定量PCR结果显示多种与神经干细胞自我更新和多向分化有关的基因表达上调。流式细胞检测结果显示诱导成球后第3天UC-MSCs常用表面标志CD13,CD44,CD90,CD105表达明显下降。蛋白芯片结果显示诱导成球前后大多数细胞因子的表达水平没有明显变化。 结论:我们的数据显示,UC-MSCs能够有效诱导产生NSCs,这些UC-MSCs来源的NSCs将为未来神经替代治疗神经系统疾病提供理想的细胞来源。
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