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目的: 本实验以不同剂量调衡方(THP)含药血清对Lewis肺癌细胞进行干预,通过检测含药血清对细胞增殖、凋亡的影响研究其抑瘤作用,同时检测含药血清对STAT3、STAT5、Bcl-2、Bax基因表达的影响,从而进一步研究THP抑瘤作用的分子机制,为深入认识中医药抗肿瘤作用提供科学依据。 方法: 1.制备SD大鼠THP含药血清:随机分成4组即THP大、中、小剂量组及正常对照组,每组各8只,连续给药5天后,仅给水12h,再给予THP灌胃1天,腹腔麻醉,心脏内采血,血清离心并灭活,用0.45um滤器过滤分装,-70℃冰箱冻存。 2.以THP含药血清大、中、小剂量,AG490(25umol/L)及中剂量THP含药血清+AG490(25umol/L)对Lewis肺癌细胞进行干预,并设立阴性对照组(SD大鼠正常血清)。 3.用MTT法检测上述六组对Lewis肺癌细胞干预24h、48h、72h后细胞增殖的状况;吖啶橙染色观察干预Lewis肺癌细胞的凋亡状况。 4.RT-PCR法检测不同含药血清干预后Lewis肺癌细胞中STAT3、STAT5和Bcl-2、Bax的基因表达水平。 结果: 1.MTT法检测结果显示,在不同时间段THP含药血清对Lewis肺癌细胞增殖有着显著抑制作用(P<0.01),抑制率随着药物浓度的增加和干预时间的延长而增高,且中剂量+AG490组比AG490组对Lewis肺癌细胞有明显的抑制作用(P<0.01); 2.吖啶橙染色显示,THP含药血清各剂量组均可对Lewis肺癌细胞凋亡起促进作用,其中THP中剂量+AG490组作用最显著(P<0.01); 3.RT-PCR法检测结果显示,THP含药血清干预Lewis肺癌细胞后,细胞内STAT3、STAT5和Bcl-2均为低表达(P0.01),Bax为高表达(P<0.01);中剂量+AG490组在六组中STAT3、STAT5和Bcl-2基因表达最低,Bax基因表达最高。 结论: 实验结果证明THP具有显著抑瘤作用,可显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖并促进细胞凋亡。研究结果提示,THP可能通过降低JAK-STAT信号转导通路中STAT3、STAT5基因表达而发挥作用,此外THP能降低Bcl-2表达、提高Bax的表达而促进肿瘤细胞的凋亡。THP与JAK激酶抑制剂AG490联合使用时,具有协同效果,能增强抑制Lewis肺癌细胞的作用。