[目的]通过建立大鼠深低温、亚低温、常温停循环模型,对比不同温度停循环所造成的大鼠缺血缺氧状态下大鼠脑海马组织中miRNA-30a和miRNA-181a及相应自噬蛋白的表达变化,探究深低温停循环对大鼠海马神经细胞miRNA及自噬蛋白的影响。[方法]选取健康SD大鼠23只,雌雄不限,体重350g-400g,将20只大鼠随机分配成深低温停循环组(DHCA)、亚低温停循环组(MCA)、常温停循环组(NTCA)和正常对照组(NC)4组(每组5只),剩余3只作为体外循环预冲液。体外循环模型建立后,分别对4组大鼠进行相应温度及停循环时间控制:DHCA组处理条件为大鼠20℃～28℃肛温下停循环10min,HCA组大鼠处理条件为28℃～35℃肛温下停循环10min,NTCA组大鼠处理条件为36℃～37℃肛温下停循环10min,NC组大鼠处理条件为36℃～37℃肛温下不停循环10min。各组大鼠达到实验设定条件后,立即断头取脑,将海马组织完整取出后液氮保存。采用实时荧光定量PCR技术对海马组织中miRNA-30a和miRNA-181a在不同温度模型下表达量进行检测。应用Wester-blot法和实时荧光定量PCR技术对海马组织中自噬关键蛋白Beclin-1和ATG-5在不同温度下蛋白质和相应mRNA表达量进行检测。采用相应统计学方法进行分析。[结果](1)miRNA实时荧光定量PCR结果:深低温停循环情况下miRNA-30a,miRNA-1 81a的表达比常温及亚低温停循环情况下表达量高,更接近正常对照组。(2)自噬蛋白Beclin-1、ATG5的Wester-blot法、实时荧光定量PCR技术结果:Western-blot表明深低温停循环组相对常温停循环组及亚低温停循环组Beclin-1,ATG5表达量下降,且与空白组自噬基因Beclin-1,ATG5表达量相近。实时荧光定量PCR技术表明深低温停循环组相对常温停循环组及亚低温停循环组Beclin-1,ATG5表达量下降,与对照组Beclin-1,ATG5表达量相近。与Western-blot结果相同。[结论](1)缺血缺氧可使大鼠海马组织产生自噬,且不同温度对自噬的影响程度不同,温度越低,对自噬的抑制越大;(2)深低温停循环下miRNA-30a,miRNA-181a表达量下降;深低温停循环下Beclin-1,ATG5表达量升高;(3)缺血缺氧条件下,深低温可能通过影响miRNA表达进而调控自噬来发挥脑保护作用。