参芪扶正注射液是用黄芪、党参制成的，具有扶正固本、益气补虚、活血化瘀的功效。参芪扶正注射液是首家批准上市的纯中药澄明大输液，不仅是肿瘤患者理想的保护造血系统功能、改善免疫功能及生活质量的辅助治疗药物，而且是冠心病、心绞痛、中风患者较理想的治疗药物。 本研究在改良传统制剂工艺的基础上，按照处方筛选获得的最终制剂处方制成注射用参芪扶正注射液（小水针）。根据药品注册管理办法的规定，属于中药、天然药物八类“改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。” 一、工艺研究 1.总皂苷的提取与纯化工艺 1.1总皂苷的提取 以总皂苷含量为指标，对乙醇浓度、用量、提取次数及提取时间进行正交试验，确定总皂苷的最佳提取工艺为6倍量的7O％乙醇加热回流提取3次，90min/次。验证性试验说明工艺最优。 1.2总皂苷的纯化 分别进行了不同吸附树脂对总皂苷的静态吸附量和对总皂苷静态吸附-洗脱性能试验，结果表明D-101型树脂最佳。对D-101树脂参芪总皂苷动态吸附性能进行了测定，饱和吸附量为240.3mg，动态吸附率为10.78mg/ml。对不同体积分数乙醇及用量对黄芪总皂苷洗脱性能进行了考察，结果表明黄芪总皂苷主要集中在20％乙醇到80％乙醇洗脱部分，因此，洗脱工艺为上样后先以蒸馏水脱杂质后，继以80％乙醇洗脱参芪总皂苷部位，用量各为4倍量树脂柱体积。验证性试验纯化工艺最优。 1.3总皂苷提取物干燥条件的研究 以干燥前后总皂苷重量差为指标，对干燥时间、干燥温度、干燥真空度进行正交试验，确定干燥工艺为干燥真空度为0.06Mpa，干燥温度为60℃下干燥时间6小时。验证性试验说明干燥条件最优。 2.总多糖的提取与纯化工艺 2.1蒸馏水提取条件的优选 以多糖的总质量为指标对加水量、提取时间、提取温度、提取次数进行正交实验，确定工艺为加水10倍量，提取时间1.5h，提取温度60℃，提取次数2次。验证性试验说明提取条件最优。 2.2醇沉条件的优选 以多糖质量为醇沉指标，对乙醇体积分数、药液浓缩程度、静置时间进行正交实验。确定工艺为醇沉时乙醇体积分数为7O％，药液浓缩至4mL药液/g生药，静置时间为24小时。验证性试验说明醇沉条件最优。 2.3总多糖提取物干燥条件的研究 以干燥前后总多糖重量差为考察指标，对干燥时间、干燥温度、干燥真空度进行正交试验筛选，确定干燥工艺为在干燥真空度为0.07MPa，干燥温度为60℃下干燥时间4小时。验证性试验表明干燥条件最优。 3.制剂成型工艺 对增溶剂用量、pH 值、活性炭用量及灭菌工艺进行了研究，确定制剂成型工艺：取处方量党参、黄芪总皂苷及总多糖提取物，加9000ml注射用水使溶解，加吐温-80至其含量为0.5％，加聚维酮K30至其含量为0.5％，用10％氢氧化钠溶液调pH值6.5～7.5，补加注射用水至10000ml，加0.5％活性炭室温下搅拌1小时，过滤脱炭，0.22μm微孔滤膜精滤，灌装于10ml安踣瓶中，每瓶10ml，100℃灭菌60min，即得。 二、质量研究 1总皂苷含量测定 照分光光度法（中国药典2005年版一部附录VA）测定。以0.5 m1供试品溶液中对照品的量（mg）为横坐标、吸收度值A为纵坐标，绘制标准曲线，得线性方程为Y=3.56X-0.0096,R=0.9987,在0～0.20mg范围内线性良好。重复性实验RSD=1.56％，精密度实验RSD=0.93％，溶液稳定性实验RSD=1.11％，加样回收实验RSD=1.14％，三批样品总皂苷含量分别为16.5 mg、18.6 mg、19.3 mg。 2.黄芪甲苷含量测定 照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水〔35: 65〕为流动相，蒸发光散射（ELSD）检测器。以浓度的对数值为横坐标，峰面积的对数值为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：Y=1.3184X+6.7165，R=0.9984，表明进样量浓度的对数值在0.0114～0.1425mg／mL内与峰面积积分值的对数值之间呈良好的线性关系。重复性实验RSD=0.86％，精密度实验RSD=1.90％，溶液稳定性实验RSD=1.23％，加样回收实验RSD=1.35％，三批样品黄芪甲苷含量分别为0.71mg、0.66mg、0.70mg。 3.多糖含量测定 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，得线性回归方程为Y=13.738X-0.0578，R=0.9993。重复性实验RSD=1.03％，精密度实验RSD=0.91％，溶液稳定性实验RSD=0.89％，加样回收实验RSD=0.77％，三批样品多糖含量分别为30.2mg、29.6mg、29.8mg。 4.在几种输液中的稳定性试验 对本品在生理盐水及5％葡萄糖注射液中的稳定性进行了研究，8小时后观察结果，溶液无色澄明，无沉淀，变色等现象，总皂苷、黄芪甲苷和多糖含量无明显变化。说明本品与临床常规注射溶液无明显配伍禁忌。 三、稳定性研究 1.影响因素试验 1.1强光实验 将本品置于45001x±5001x照度下的光橱内放置10天，结果总皂苷、黄芪甲苷及总多糖含量略有下降，提示本品应避光保存。 1.2高温实验 将本品置于60℃±2℃温度下放置10天，结果总皂苷、黄芪甲苷及总多糖含量略有下降，提示本品应在凉处保存。 1.3高湿实验 将本品置于RH90％±5％湿度下放置10天，结果各项指标均无明显变化。 2.加速试验及长期试验 参芪扶正注射液在40℃，RH90％加速试验6个月，在25℃，RH60％条件下长期留样考察12个月，考察样品性状、澄明度、pH值、水分、蛋白质、鞣质、炽灼残渣、不溶性微粒、重金属、砷盐、树脂及总皂苷、黄芪甲苷、总多糖含量等指标，结果各项指标均符合规定。根据上述结果，本品有效期暂定为一年半。